MicroRNA-150作为耐药因子抑制结直肠癌细胞的增殖与凋亡

来源 :广州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wooicheang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:结直肠癌是世界上第二大癌症,其发病率及死亡率仅次于肺癌。在我国,它的发病率与死亡率在众多的肿瘤中分别居于第三位与第四位,尤其在现代化率高的城市,发病率远远高于乡镇及农村。在深圳,2008年到2012年5年间,深圳前10位的恶性肿瘤排位分别是肺癌、结肠癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、白血病、鼻咽癌和食管癌,肿瘤的发病率至少是有10%多的增长。按照2012年深圳恶性肿瘤发病例数和常住人口1056万来计算,排在前三位的肺癌、结肠癌和乳腺癌的发病率分别为10万分之13.75,10万分之12.18和10万分之10.08。结直肠癌的发病率有所上升,再加上化疗药物耐药性的存在,导致结直肠癌患者的预后较差。因此,降低化疗药物耐药性,提高结直肠癌患者的化疗效果,成为延长患者生命,提高结直肠癌患者生存率的关键。在我们前期的microRNA芯片结果显示,miR-150在结直肠癌患者化疗耐药的机制中有重要作用,为了阐明miR-150与结直肠癌耐药性的关系,结合考虑各种结直肠细胞系的耐药性结果及查阅相关文献,我们设计了以下实验。  材料与方法:  1.我们选用了结直肠癌细胞系HCT-116及HT-29,在HCT-116及HT-29中通过转染的方法过表达miR-150,然后再用5-FU处理细胞,一段时间后用WST-1检测细胞的存活度,收集数据作药物敏感性曲线图。进行药物敏感性试验来验证microRNA芯片结果。  2.为了了解miR-150在结直肠癌细胞中的作用,在HCT-116及HT-29中通过转染的方法过表达miR-150,用测凋亡试剂盒检测其对细胞凋亡作用的影响及用WST-1检测细胞的增殖情况以明确其对细胞增殖的影响。  3.用5-FU处理HCT-116及HT-29后,定量PCR检测miR-150表达水平,观察在细胞中5-FU对miR-150表达的影响。  结果:选用结直肠癌细胞系HCT-116及HT-29进行药物敏感性试验,发现过表达miR-150可以导致细胞对5-Fluorouracil(5-FU)更耐药。同时,在HCT-116及HT-29过表达miR-150能够抑制肿瘤细胞的增殖及抑制其凋亡。进而我们用5-FU处理细胞后,发现5-FU能够提高miR-150的表达水平。  结论:通过生物信息学及结合前人的发现我们推测,miR-150的靶基因c-myb, EGR2, P2X7and p53在这里起着重要的作用,它们分别通过影响细胞的增殖及凋亡从而影响细胞的耐药性。因而我们得出结论就是:在结直肠癌中,miR-150作为一个可预测的生物标志物,它在肿瘤组织中表达上调能够通过抑制细胞的增殖及凋亡来增加细胞的耐药性,并且在5-FU治疗的过程中,能够提升miR-150在细胞中的表达水平,由此构成了一个恶性循环作用于耐药患者上,耐药性由此而来。
其他文献
目的:分析用“Comet”分析法检测离体培养的人肿瘤细胞和人癌裸小鼠移植瘤DNA放射损伤的影响因素,建立用“Comet”分析法检测人肿瘤活检细胞的放射敏感性的实验方法.材料与方
肝纤维化是肝脏对不同病因引起的慢性肝损伤的弥漫性、可逆性修复反应,肝纤维化评估对于慢性肝病的诊断和疗效评价尤为重要。  肝脏星形细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的
目的:创伤后疼痛刺激作用于伤害性感受性受体,激活离子通道,增强伤害感受器敏感性和兴奋性,产生疼痛的外周敏化及中枢敏化,其机制复杂且至今尚未明晰。在细胞损伤或炎症状态下,细胞
研究背景:  口腔种植修复经过多年的发展,现已成为牙列缺损和牙列缺失的常规修复方法之一。种植义齿有着传统义齿无法比拟的优点,如:美观性、舒适性、高效性、稳定性、持久性,且
我从乡镇中学调到县城里,同事们都很羡慕我。至于是否嫉妒我或者忌恨我,那就不得而知了。因为那时候年轻,心里一片阳光灿烂,加之本身也没有什么心眼儿,所以心里眼里都是好人好事儿。我们的同行王老师,从我调走之后,对我是格外热情、亲近,比我们过去在一起工作期间要友好得多。其间,有两次回乡镇,乘坐长途大客车的时候,我和王老师都巧遇。那时的我们,虽然挣钱不多,但是大家都很讲究义气和面子。每次同乘那趟从乡镇到县城
期刊