lncRNA AC007392.4在结直肠癌发生发展中的作用及机制研究

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结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)作为如今普外科最常见的消化道肿瘤之一,由于缺乏有效的分子诊断及治疗靶标,疾病一旦确诊,患者基本都已经位于中晚期,而目前主要的治疗手段还是以手术治疗为主,多数患者预后不是很理想。长链非编码RNA(long non-coding RNA)属于一类长度约为220nt的非编码RNA,已有研究表明其参与结直肠癌等多种恶性肿瘤的发生发展。然而,lnc RNA AC007392.4在结直肠癌中的功能尚不清楚,因此,本研究首次系统性探索其在结直肠癌中的生物学功能,并且初步探索在结直肠癌中AC007392.4发挥生物学功能的潜在分子机制。目的:结直肠癌为我国常见的恶性肿瘤之一,本研究以前期筛选的lnc RNA AC007392.4为研究对象,探讨其参与结直肠癌恶性生物学功能及潜在分子机制,为结直肠癌的临床诊断和治疗提供重要参考依据。方法:通过癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)分析长链非编码RNA AC007392.4在结直肠组织的表达情况,接着通过临床样本验证AC007392.4在结直肠癌中的表达;通过皮尔森相关性的计算寻找在AC007392.4下游的蛋白编码基因,并对这些蛋白编码基因进行生物过程及生物途径等方面的富集分析;设计合成AC007392.4载体和si RNA,通过脂质体转染法转入SW480细胞株,对AC007392.4在结直肠癌细胞株中行细胞功能学实验;最后采用实时荧光定量PCR方法检测AC007392.4对下游通路关键分子mRNA的影响。结果:1)TCGA数据库显示AC007392.4在结直肠癌中表达上调,且与结直肠癌患者的病理分期有关,临床样本也显示了AC007392.4在结直肠癌中高表达;2)相关性分析显示共有2354个蛋白编码基因与AC007393.4表达具有高度相关性,且这些蛋白编码基因显著地富集在DNA损伤修复与细胞周期相关的通路中;3)CCK-8实验和细胞凋亡实验表明AC007392.4促进结直肠癌细胞增殖的同时抑制其凋亡;4)细胞周期相关实验显示:敲低AC007392.4后可使细胞周期G2/M期发生阻滞;5)实时荧光定量PCR结果显示:敲低AC007392.4后,细胞周期分子CDK1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:AC007392.4在结直肠癌中表达量升高,促进结直肠癌细胞的增殖并抑制凋亡,可能通过调控细胞周期参与了结直肠癌的发生发展,本研究为结直肠癌的临床诊断及分子靶向治疗提供潜在的理论依据。
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