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目的:不同浓度的硝普钠诱导体外培养的乳兔髁突软骨细胞凋亡,检测它们之间的效应关系,为深入研究一氧化氮在颞下颌关节病致病机制中的作用提供实验资料。
方法:体外培养乳兔髁突软骨细胞,经不同浓度的硝普钠(0mol/L、0.001mol/L、0.002mol/L、0.004mol/L、0.008mol/L)诱导12h、24h、48h,运用HE和TUNEL免疫染色,镜下观察髁突软骨细胞的凋亡形态,并测算细胞凋亡率。
结果:低浓度(0.001mol/L)硝普钠作用12h即可诱导乳兔髁突软骨细胞凋亡,出现软骨细胞的形态学变化,随作用时间的增加,软骨细胞凋亡率明显上升(P<0.05);随硝普钠浓度倍增,凋亡的髁突软骨细胞数急剧增多,0.008mol/L硝普钠作用12h髁突软骨细胞凋亡率可达50%以上,甚至会出现细胞坏死,各组间比较差异具有显著性(P<0.05);各浓度组随作用时间的延长,髁突软骨细胞的凋亡率呈明显升高趋势,具有显著性差异(P<0.05)。
结论:一氧化氮浓度与乳兔髁突软骨细胞凋亡之间存在量效和时效关系,随一氧化氮浓度升高,软骨细胞凋亡率升高,随作用时间延长,软骨细胞凋亡率升高,提示颞下颌关节内氧自由基增多是诱发颞下颌关节病的重要因素之一。