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目的:
研究软骨源性形态发生蛋白-1(Cartilage-derived morphogenetic protein-1,CDMP-1)联合碱性成纤维生长因子(basic fibroblast Growth Factor,bFGF)体外诱导脂肪干细胞(adipose derived stem cell,ADSCs)向软骨细胞分化的协同作用。
方法:
ADSCs(cyagen oricell)用含10%胎牛血清L-DMEM培养至第三代,按添加生长因子的不同分为4个实验组,组A:对照组(不加任何生长因子);组B:50ug/lCDMP-1;组C:10ng/ml BFGF;D组:50ug/l CDMP-1+10ng/ml bFGF,倒置显微镜镜观察细胞形态的变化,培养4、7、14d的细胞用MTT法测定各组间增殖和分化能力,14天后分别于观察各组间细胞形态学变化,行阿尔新兰染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色
结果:
MTT法检测CDMP-1与bFGF对细胞增殖的影响中CDMP-1+bFGF组>bFGF组>CDMP-1>对照组,ColⅡ免疫细胞化学染色证实CDMP-1+bFGF组细胞阳性率最高(p<0.05)。阿尔新兰染色A组阿尔新蓝染色阴性,B、C组呈淡蓝色,D组呈蓝色。
结论:
细胞因子CDMP-1和bFGF联合应用较单个细胞因子可以明显促进脂肪干细胞增殖,并能诱导其向软骨细胞表型分化。