转基因食品溯源管理与欧盟转基因大米检测方法评价

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转基因作物是一类通过基因工程将外源目的基因片段转入到原有作物的基因组中,从而得到带有特殊性状的作物。1983年全球第一例转基因烟草在美国问世,1996年美国最早开始商业化生产和销售的转基因作物。自美国进行转基因作物的研究开始以来,美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)审批的转基因作物品种已有40余种。目前,中国没有批准转基因作物商业化种植。2005年以来,中国出口欧盟大米中屡屡被检测出转基因成分。欧盟委员会于2008年发布2008/289/EC(3)号决议批准针对米制品中的非法转基因成分转cry1A(b/c)基因抗虫杂交稻组合Bt汕优63(Bt63)采取紧急措施。根据决定要求,产品进入市场前,经营者应向相关机构提交一份官方检测报告,证明米制品中无Bt63转基因成分污染的检测报告。此外,该决议还规定成员国对于进口及已投放欧盟市场的米制品需随机抽样并按照2008/289/EC(3)号决议指定的方法检测分析,以确保不含有转基因成分。欧盟委员会于2011年又通过了2011/884/EU决议,此决议扩大了2008/289/EC决议所规定措施的范围,从只针对Bt63转基因水稻成分,扩大到任何转基因成分,致使中国出口欧盟大米多次发生被拒收、退货、撤销合同等事件,造成了很大的经济损失。为了更好的对转基因进行管理,在建立优化的转基因产品的检测方法的基础上对转基因产品溯源是实现转基因严格管理的重要途径之一。EAN?UCC系统是对产品进行溯源的一个重要手段。EAN?UCC全球统一标识系统是国际物品编码协会(Globe Standard 1,GS1)统一制定。目前,中国标准按照EAN·UCC系统的规则进行编码。UCC/EAN-128条码是由国际物品编码协会共同制定的一种特定的条码符号,具有应用成熟和全球开放的优越性。本研究对转基因植物产品从产地、产品、采收、加工、包装、仓储、运输、销售8个环节进行信息收集,并根据国家标准中规定相应编码规则对这8个环节进行UCC/EAN-128码的设计与编码,建立转基因植物产品UCC/EAN-128码的框架及规则,在国内首次对转基因农产品进行了UCC/EAN-128编码研究。通过扫描条形码,获取相关数据,并将获得数据与计算机建立的数据库相结合,进行信息读取,可以了解转基因植物产品的生产、加工、包装等信息,从而对转基因植物产品进行有效的溯源。本课题以转基因棉花、棉籽粕、棉籽油为材料,根据UCC/EAN–128码的编码规则及框架,对转基因籽棉种植、产品、加工、运输、仓储、销售6个主要环节进行信息收集与UCC/EAN–128码的编码。根据《农业转基因生物标识管理办法》的规定,在转基因产品标签上进行标识,确定了设计编码的可操作性。本研究以出口年糕和白粿干为材料,根据UCC/EAN-128码的编码规则,对非转基因大米种植、产品、加工、运输、仓储、销售6个主要环节进行信息收集,并在产品编码中加入非转基因编码进行标识,从而对非转基因产品与转基因产品进行溯源,从其产品编码可迅速识别转基因农产品或非转基因农产品。一旦产品被检测出转基因成分,可以通过解读UCC/EAN-128条码得到的信息,追溯出水稻种子来源、播种日期、收割、大米碾磨、年糕和白粿干加工、包装和仓储等日期和批次,查出问题出现的关键环节,并且通过对各个环节的留存样品进行转基因检测予以证实,为米制品的可追溯性提供技术保障。UCC/EAN-128条码可以通过在米制品包装上加贴条形码标签来施行,成本低廉,易于推广。本研究采集了6个国家和地区的76个大米及大米制品样品,使用实时荧光PCR仪对欧盟决议2011/884/EU提出的两种转基因大米检测方法—荧光染料法(SYBR Green实时荧光PCR法)和双重探针法(Taq Man实时荧光PCR法)及欧盟决议2008/289/EU的转基因大米检测方法—探针法(Taq Man实时荧光PCR法)进行了比较研究。取样、DNA提取及PCR反应等实验步骤严格按照欧盟检测方法进行,对每一大米样品进行以上三种方法的检测,并对检测结果进行了比较分析,从而对对三种检测方法进行了评价。结果表明,76份大米及米制品中,采用2011/884/EU SYBR Green方法检测出有23.68%(18/76)样品为阳性。同时采用2011/884/EU Taq Man双重实时荧光PCR方法和2008/289/EC Taq Man实时荧光PCR法检测,只有5.26%(4/76)的样品为阳性。采用2011/884/EU决议指定的SYBR Green实时荧光PCR法检测的阳性率高于该决议指定的另一种方法双重Taq Man实时荧光PCR和2008/289/EC指定的方法Taq Man实时荧光PCR。本研究还分别采用不同试剂(Fast SYBR Green试剂和Power SYBR Green试剂)、不同仪器(实时荧光PCR仪ABI Viia7和实时荧光PCR仪ABI 7300)对同一样品进行了检测研究,并分别对检测结果进行统计学分析。本课题根据UCC/EAN-128码的规则建立了对转基因农产品与非转基因农产品进行溯源的方法,为我国实施转基因农产品的溯源提供了技术基础。目前还未见我国有利用UCC/EAN-128码对转基因农产品进行溯源的相关报道,本研究具有一定的前瞻性。本研究还对欧盟转基因大米检测方法进行了评价,该检测方法也是对转基因大米进行溯源确证的重要技术手段。
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