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迄今为止,大多数产业化的小球藻培养系统仍采用传统的自养培养方式。但是,这种培养方式得到的生物量一般为200~600mg/L干细胞,而在本实验室研究获得的异养培养体系中最高生物量可达48g/L干细胞,这为开发这一资源提供了一条新途径。目前国内外对自养小球藻的活性和保健功能的研究已十分深入,并已阐明,自养小球藻具有较高的营养价值和各种功能活性如提高免疫力、抗肿瘤、抗辐射和解毒等。但是,这方面的研究对异养小球藻涉及较少。本文采用高效液相色谱、气相色谱、氨基酸分析等现代分析技术,对异养蛋白核小球藻营养成分进行了分析,并利用动物实验着重对其免疫功能活性进行了较系统、深入的研究。主要结果如下: 1.异养蛋白核小球藻藻粉含蛋白质(27.6%)、脂肪(8.7%)、淀粉(38.2%)等主要营养成分。异养蛋白核小球藻与自养蛋白核小球藻相比,淀粉含量有所提高,粗蛋白及粗脂肪含量有所下降。氨基酸总含量占干重的19.96%,含有17种氨基酸,其中至少有7种必需氨基酸,且必需氨基酸占总氨基酸的31%。在17种氨基酸中以具有健脑作用的谷氨酸含量最高,为4.19%,在7种必需氨基酸中亮氨酸含量最高,为1.37%。异养蛋白核小球藻藻粉的不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的77.24%,而且链长集中在C16~C18,其中必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸含量分别为47.17%和13.03%。异养蛋白核小球藻藻粉的叶黄素含量为0.2%。 2.下列各项动物试验结果表明,异养蛋白核小球藻藻粉能显著地提高小鼠的免疫活性功能。 2.1 在小鼠碳廓清试验中,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组小鼠吞噬细胞的吞噬指数均有显著性提高(P<0.05),且剂量~效应呈正相关关系,以高剂量组(500mg/kg.bw)作用最强,小鼠的吞噬指数提高了22%。 2.2 在小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验中,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组小鼠巨噬细胞的吞噬指数和吞噬率均有显著性提高(P<0.05),且剂量~效应呈正相关关系,以高剂量组作用最强,小鼠的吞噬指数和吞噬率分别提高了44%和48%。这说明,异养蛋白核小球藻藻粉能显著增强小鼠的巨噬细胞活性功能。 2.3 在自然杀伤(NK)细胞活性测定试验中,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组小鼠的NK细胞活性均有提高,且剂量~效应呈正相关关系。其中高剂量组与对照组相比有显著性差异(P<0.05),小鼠的NK细胞活性提高了77%。2口仍硕全学应‘落丈 2.4在小鼠脾淋巴细胞转化试验中,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组均能提高小鼠淋巴细胞增殖能力,且剂量效应呈正相关关系。其中高剂量组与对照组相比有显著性差异(P<0.05),小鼠淋巴细胞增殖能力提高了71%。 2.5在迟发型变态反应试验中,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组与对照组相比较,T淋巴细胞增殖能力均有提高,且剂量一效应呈正相关关系。其中高剂量组能显著地增强小鼠T淋巴细胞活性功能(P<0.05),小鼠淋巴细胞增殖能力提高了14%。这表明,异养蛋白核小球藻藻粉能促进小鼠淋巴细胞增殖和转化,显著地增强小鼠由T淋巴细胞介导的特异性免疫功能活性。 2.6在生成抗体的浆细胞数检测试验中,异养蛋白核小球藻藻粉低、中、高剂量与对照组相比均有显著性差异(P<0.05),以中剂量作用最强,小鼠的体液免疫功能活性提高了21%。结果表明,异养蛋白核小球藻藻粉能显著地增强小鼠体液免疫功能活性。 2.7在血清溶血素测定试验中,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组均能显著地提高小鼠半数溶血值(P<0.05),以中剂量组作用最强,小鼠的体液免疫功能活性提高了72%。 3.30天喂养试验结果表明,异养蛋白核小球藻藻粉各剂量组与对照组相比,小鼠的体重没有显著性差异(P>0.05),即异养蛋白核小球藻藻粉对小鼠体重无显著性影响。 4.在急性毒性试验中,经七天观察,各组动物未发现有明显中毒反应,也无一例死亡,异养蛋白核小球藻藻粉LDS。>l 0.00岁kg.bw.,按急性毒性分级标准,属实际无毒物质。