酶法制备烷基多糖苷及其抑菌性研究

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玉米芯木聚糖的产量大,但利用率较低,烷基糖苷(Alkyl Polyglycoside)是新一代环保型绿色表面活性剂,应用广泛,但传统的糖苷化合物的合成方法有许多缺点,因此利用具有水解活性和转糖苷活性的木聚糖酶可以安全有效的合成烷基糖苷。本课题以研究不同碳链长度的丙醇和辛醇与玉米芯木聚糖在海栖热袍菌(Thermotoga maraitima)木聚糖酶B(XynB)的作用下合成烷基多糖苷的最佳制备条件,对制备出的辛基多糖苷及丙基多糖苷进行了理化性质的测定,并对抗氧化性和抑菌活性进行测定为目的。具体研究内容如下:1、酶法制备正辛基多糖苷。因为水解活性是转糖苷活性的基础,所以首先对海栖热袍菌来源的木聚糖酶进行水解活性的研究。以玉米芯为底物,对酶解时间,酶解温度,pH值,底物浓度,酶加量进行优化,通过DNS法测定还原糖浓度,得到酶解玉米芯最佳条件为70℃下水解时间6h,缓冲液pH为6.0,底物浓度为3%,加酶量为140U/g。辛基多糖苷的制备通过薄层色谱法定性筛选,得到最佳制备条件为:最佳制备条件为70℃下反应3h,缓冲液pH为6.0,底物浓度为45mg/ml,加酶量为140U/g,这为工业生产提供一定的理论基础。对合成产物的乳化性能和泡沫性能进行测定,结果表明,正辛基多糖苷的乳化性较好,起泡力较强且泡沫稳定性高。具备优质表面活性剂的性能。2、酶法制备丙基多糖苷。通过薄层色谱法定性筛选,丙基多糖苷的制备,最佳制备条件为70℃下反应3h,缓冲液pH为6.0,底物浓度为45mg/ml,加酶量为140U/g,这同样为工业生产提供一定的理论基础。对合成产物的乳化性能和泡沫性能进行测定,结果表明,正丙基多糖苷的乳化性较差,且起泡力不强,泡沫稳定性也较差。因此不适合作为表面活性剂。3、正辛基多糖苷及正丙基多糖苷的抗氧化活性及抑菌活性的研究。通过研究DPPH·自由基清除作用,在清除率达到80%时,正辛基多糖苷和正丙基多糖苷的浓度均低于0.3mg/mL。通过研究·OH自由基清除作用,在清除率达到80%时,正辛基多糖苷和正丙基多糖苷的浓度均低于0.5mg/mL。通过实验结果可知,合成产物正辛基多糖苷和正丙基多糖苷的抗氧化性较强。通过平板抑菌实验结果显示,辛基多糖苷及丙基多糖苷对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌有较好的抑菌作用。24h后测定最小抑菌浓度,辛基多糖苷对大肠杆菌的MIC为5mg/ml,对金黄色葡萄球菌的MIC为5mg/ml。丙基多糖苷对大肠杆菌的MIC为7.5mg/ml,对金黄色葡萄球菌的MIC为5mg/ml。
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