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黑色素瘤是一种最致命的恶性肿瘤,它有着许多与其他肿瘤不同的生物学特性,比如在其他多种肿瘤中突变导致失活的p53基因,在黑色素瘤中就是野生型表达的。黑色素瘤的另一个特性就是高表达促进细胞生存的Bcl-2蛋白家族成员Mcl-1,并且这种表达随着疾病的进程逐步增高。Mcl-1蛋白是黑色素瘤对细胞受到刺激时,包括内质网压力(ER stress)下主要的适应机制,同样它在黑色素瘤针对药物治疗的抗性作用中也扮演重要角色。由于Mcl-1通常在转录后水平会受到调控,我们试图研究在药物引起内质网压力下黑色素瘤中Mcl-1的表达升高, microRNAs(miRNAs)是否参与了其中的调控。在内质网压力诱导剂衣霉素(TM)所引起的一系列miRNAs的变化中,microRNA-149*表达的增强是最显著也是最持久的。内质网压力对microRNA-149*的作用表现出黑色素瘤细胞的特异性,在其他多种细胞类型,包括黑色素细胞,都没有出现microRNA-149*对内质网压力的响应,虽然我们在其他细胞内也观察到了作为内质网压力标志物的GRP78蛋白的上调。我们分析了60株新鲜已转移的黑色素瘤组织样本,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法发现其中的59株样本都高表达microRNA-149*,并且这60株病例样本中microRNA-149*表达的平均水平相对于正常的黑色素细胞来说高达12倍之多。因此,我们发现黑色素瘤中microRNA-149*本身就高表达,并且在内质网压力的作用下,microRNA-149*的表达水平进一步提高。肿瘤抑制基因p53在细胞受到刺激时被激活,保护细胞不发生恶性转化。通常,p53蛋白通过激活激活DNA修复机制来保护细胞,或者在这种损害无法修复的时候,通过诱导细胞凋亡来清除这部分损害的细胞。p53基因在很多种肿瘤细胞中频繁发生突变,造成功能失活,但在黑色素瘤细胞内,p53基因的突变失活的情况并不多见,并且通常是野生型的p53蛋白高表达,作为肿瘤恶化的判断依据,并不能起到有效的肿瘤抑制因子的作用。虽然很多p53的下游靶基因在黑色素瘤内不能被有效的调节,但黑色素瘤中p53蛋白肿瘤抑制功能缺失的分子机制仍有待阐明。我们主要研究论证了p53直接上调microRNA-149*的表达,而microRNA-149*可以通过靶向抑制糖原合成激酶3a(GSK3a)的表达,引起Mcl-1蛋白水平的提高,最终导致黑色素瘤细胞对凋亡的抗性作用。而抑制microRNA-149*的功能就破坏了黑色素瘤细胞的生存机制,并且抑制了在体外移植成瘤实验中黑色素瘤的生长。在新鲜的转移性黑色素瘤提取物中,高表达的micro-RNA149*伴随着GSK3a表达的减弱以及Mcl-1表达的增强。我们的实验结果揭示了一条新的p53依赖的,microRNA-149*介导的促进黑色素瘤生存的信号通路,并且提供了一个关于p53丧失抑制黑色素瘤功能的合理解释。此外,microRNA-149*的表达也是黑色素瘤中Mcl-1蛋白表达增强的一个参与机制。我们期望microRNA-149*能成为黑色素瘤形成过程中有效的生物标志物,并成为新的的黑色素瘤治疗靶点。