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干扰素是机体在一系列诱导因素的作用下，产生的一类具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节功能的细胞因子。从1957年Isaacs和Lindenmann发现至今，已有很多关于干扰素的研究报道，其中大多数是着重于干扰素的规模化生产研究，以满足在疾病治疗方面的需求。IFN作为动物体内所知作用最快的第一道防御体系，对病毒性疾病的治疗起到极其重要的作用。但是IFN机体自身表达量较低，无法满足防治疾病的要求。所以利用基因工程技术，体外大规模获得IFN十分必要。目前所知的干扰素表达系统有大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、动物细胞表达系统和植物表达系统。其中大肠杆菌表达系统目前研究较为深入，具有培养条件简单，操作容易，培养周期短，成本低，产量高，易于规模化等有优点。不足之处是其表达的蛋白常以包涵体的形式存在。本实验，构建了pET32-PoIFNα/BL21（DE3）重组菌株，并可溶性的表达出了PoIFNα。纯化，WB鉴定后，进行了生物活性测定，结果表明具有较好的抗病毒活性。主要结果如下：根据GeneBank中报道的猪α干扰素基因序列（M28623），设计一对引物。以猪肝脏基因组DNA为模板，PCR扩增出猪α干扰素成熟肽基因。克隆到pET32质粒中，构建了重组质粒pET32α-PoIFNα。经PCR鉴定，双酶切鉴定和测序鉴定后，转化入BL21（DE3），筛选得到含表达质粒的基因工程菌pET32-PoIFNα/BL21（DE3）。诱导重组菌株表达，产物经SDS-PAGE蛋白电泳分析，在3.8×104的位置出现了目的蛋白条带，与预期相符。并且，通过还原上样缓冲液和非还原上样缓冲液两种方法处理样品，证明表达蛋白是以有活性的单体形式存在的。经过温度、IPTG、诱导时间的摸索，确定了可溶性表达的最佳条件为22℃、0.5mM IPTG、诱导10h。在最佳条件下，大规模诱导工程菌，表达产物经镍柱亲和层析纯化，得到了纯度较高的重组蛋白。WB鉴定，进一步证实了表达产物确实为PoIFNα。纯化产物透析除盐后冻干，4℃冰箱保存。使用干扰素预处理Marc145细胞，然后用100CCID50的PRRSV攻击，结果表明，PoIFNα具有抗病毒活性。为下一步PoIFNα的开发奠定了基础。