罗伯茨绿僵菌作为虫生真菌的模式生物,在虫生真菌的代谢调控,致病机理等研究中起着重要的作用。绿僵菌致病和抗逆相关基因功能的解析,可为从转基因育种角度提高罗伯茨绿僵菌的杀虫效率奠定重要研究基础。cAMP信号通路是真核细胞中识别胞外信号的重要调节机制之一,其中蛋白激酶A在信号通路中承担着重要角色,特别是在形态形成,新陈代谢,应激反应,交配和分生孢子等生物学特性上起重要作用。目前罗伯茨绿僵菌在cAMP依赖的蛋白激酶A基因（Metarhizium robertsii Protein Kinase A,Mrpka）的功能的研究少见报道。本文研究以罗伯茨绿僵菌为研究对象,针对Mrpka基因;利用农杆菌介导的遗传转化方法,获得Mrpka敲除突变株和回补突变株,并比较了野生株、敲除株和回补株在生物学性状上的差异。具体研究结果如下:（1）通过用稻瘟病菌Magnaporthe oryzae CPKA（MGG₀6368）蛋白在NCBI比对查找得到罗伯茨绿僵菌的假定PKA蛋白（MAA₀5976）,序列相似性为67%;通过功能域分析发现假定的罗伯茨绿僵菌的PKA基因,具有STKc PKA like结构域;此外,进一步通过真菌cAMP依赖的蛋白激酶A基因的系统发育树的构建,发现罗伯茨绿僵菌的假定PKA蛋白和金龟子绿僵菌的cAMP依赖的蛋白激酶A基因同源性最高,因此本研究认定这个MAA₀5976基因即为罗伯茨绿僵菌中cAMP依赖的蛋白激酶A的基因,并命名为Mrpka。（2）利用PCR技术扩增其上下游基因序列,构建敲除质粒,并测序验证;利用PCR技术扩增其目的基因序列,构建回补质粒,并测序验证。将敲除质粒转化农杆菌,利用农杆菌介导的遗传转化方法获得Mrpka的敲除突变株;将回补质粒转化农杆菌,以敲除株为出发菌株,利用农杆菌介导进行随机插入,获得回补株。（3）比较野生型,敲除株和回补株之间的生物学特性发现:1)菌落形态:在PDA上与野生型罗伯茨绿僵菌相比,Mrpka敲除株菌落边缘圆滑规则,菌丝向四周呈现放射状,菌落大小较野生型小和菌落颜色也略浅于野生型。在SDAY上与野生型罗伯茨绿僵菌相比,Mrpka敲除株菌落菌丝生长量少。2)菌落生长速率:与野生型罗伯茨绿僵菌相比,Mrpka敲除株在PDA,SDAY,1/4SDAY培养基上的生长直径均小于野生型。3)孢子产生:与野生型绿僵菌相比,Mrpka敲除株在PDA培养基上的产孢量有了明显的下降趋势,下降了43%。4)化学药品耐受:敲除株的生长直径均小于野生型,且在刚果红、甲萘醌、H₂O_2、多菌灵抗逆环境中抑制率与野生型相比分别提高了95%,211%,35%和100%。5)紫外辐射耐受:敲除株的相对萌发率在12h,16h,20h和24h,4个观测节点上均高于与野生型罗伯茨绿僵菌,且在12h时最高,与野生型相比提高了23%。6)热耐受:敲除株的相对萌发率在每个时间点均低于与野生型罗伯茨绿僵菌,且在12h时最高,与野生型相比降低了54%。综上所述,Mrpka基因参与了罗伯茨绿僵菌的生长发育调控,同时,Mrpka基因也参与了罗伯茨绿僵菌的抗逆过程,包括抗氧化、耐热以及对紫外的不敏感。