【摘 要】
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干旱是我国农业最主要的自然灾害。它影响了植物的生长发育,造成作物严重减产,加剧了全球性的粮食危机。在中国,有将近1/3的土地处于干旱和半干旱状态,7%以上耕地处于干旱和盐碱之
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干旱是我国农业最主要的自然灾害。它影响了植物的生长发育,造成作物严重减产,加剧了全球性的粮食危机。在中国,有将近1/3的土地处于干旱和半干旱状态,7%以上耕地处于干旱和盐碱之中。随着土地沙漠化的加剧,以及淡水资源的日益短缺,这一数字还在不断上升。因此培育抗旱新品种是利用干旱地的一条经济而有效的途径。 海藻糖在生物体内扮演极其特殊的角色,它具有保护细胞膜和蛋白质结构的特殊功能,使生物体具有较强的抗旱、抗寒的能力,且对蛋白质制品、食品具有特殊的保护作用。 本研究利用担子菌灰树花海藻糖合酶基因(Tsase)遗传转化烟草,以进一步验证该基因的功能。首先将Tsase基因取代植物表达载体pBBB-ETR的ETR基因构建植物表达载体pBBBT,然后利用“三亲交配”法导入超毒性农杆菌菌株EHA105中,接着通过农杆菌介导法遗传转化烟草,经过连续的PPT抗性筛选,获得20株抗性植株。抗性植株经PPT体外抗性初筛,获得3株阳性植株;经PCR检测,其中的2株呈阳性反应;接下来的Southern杂交检测结果仍呈阳性,证明海藻糖合酶基因已整合到烟草基因组中。通过HPLC/ELSD法测得这两株转基因烟草海藻糖含量分别为2.126mg/g FW和2.556mg/g FW,而对照则检测不出海藻糖。与对照相比转基因烟草在形态上发生了明显的改变:叶片颜色变深绿;叶片增厚;主叶脉变粗壮等。田间抗旱试验结果证明转基因烟草的抗旱性得到了增强。这为植物抗旱基因工程的研究打下了良好的基础,同时也为利用植物生物反应器生产海藻糖奠定了基础。
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