马铃薯块茎自然愈伤所需时间较长,但愈伤机理尚不明确。本文以“陇薯3号”马铃薯块茎为试材,采用100mg/L苯并噻重氮处理损伤块茎,评价处理对块茎愈伤效果的影响,分析处理块茎Strbohs家族基因在愈伤期间的差异表达,筛选并获得过表达和干扰表达的转StrbohC基因植株,鉴定转基因块茎的愈伤效果,明确StrbohC基因在马铃薯块茎愈伤中的功能。结果表明:1.苯并噻重氮处理显著降低了块茎愈伤期间的失重率和病情指数,促进了块茎愈伤。愈伤期间Strbohs基因上调,经生物信息学分析,鉴定出6个Strboh基因,其中StrbohC上调幅度最大,该基因cDNA全长2902bp,编码938个氨基酸。此外,Strboh家族基因的染色体分布较为分散,各基因的外显子、内含子长度和数目差异较大,表明各基因发挥不同的功能。2.选取StrbohC基因,构建StrbohC过表达载体和人工miRNA的干扰表达载体,经农杆菌转化后,分别进行PCR鉴定并成功获得相应的转基因植株。通过构建eGFP融合蛋白,发现StrbohC蛋白亚细胞定位于烟草表皮细胞的质膜。3.过表达StrbohC基因的块茎愈伤期间的失重率和病情指数显著降低,第7d时,分别高出同期对照36.3%和17%,伤口处软木脂和木质素的沉积也明显增加。而干扰表达的StrbohC基因提高了块茎愈伤期间的失重率和病情指数,第7d时,较同期对照分别增加40.6%和28.7%。同样,干扰表达也减少了块茎伤口处软木脂和木质素的积累。表明,StrbohC基因参与调控了块茎愈伤结构的形成。4.过表达StrbohC基因块茎的H₂O₂和O₂^-含量明显增加,在愈伤24h时,H₂O₂含量较同期对照增加84.6%,而干扰表达StrbohC基因的块茎在愈伤期间的H₂O₂和O₂^-含量显著减少。表明,StrbohC直接影响了块茎愈伤期间的活性氧积累。综上所述,苯并噻重氮可通过降低块茎愈伤期间的失重率和病情指数促进马铃薯愈伤。愈伤期间块茎Strbohs基因上调,其中StrbohC上调最为明显。对StrbohC的过表达和干扰表达转基因块茎的愈伤鉴定结果发现,过表达块茎的愈伤速度明显提高,而干扰表达块茎的愈伤速度显著降低。由此表明,由StrbohC介导的活性氧积累在马铃薯块茎的愈伤中具有重要的调控功能。