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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起一种以感染猪发热、厌食，妊娠母猪晚期流产、早产、产死胎、弱胎和木乃伊胎，各种年龄猪(特别是仔猪)呼吸障碍为特征的高度传染性疾病。猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)，与马动脉炎病毒(EAV)、小鼠乳酸脱氢酶病毒(LDV)以及猴出血热病毒(SHFV)，同属尼多病毒目，动脉炎病毒科、动脉炎病毒属。PRRSV为有囊膜的单股正链RNA病毒，病毒粒子呈球形，核衣壳呈二十面体对称，囊膜表面有明显的纤突。PRRS病毒分为两个亚群，亚群A为欧洲原型(LV)，亚群B为美国原型(VR-2332)。PRRSV基因组全长约15kb，包括9个开放阅读框(ORF)，分别编码RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)(ORF1a和ORF1b)和7个结构蛋白(ORF2a，ORF2b，ORFs3-7)。 本研究利用纯化的PRRSV、重组N蛋白及GP5和M蛋白基因DNA分别免疫小鼠，通过细胞融合技术，以期获得稳定分泌抗PRRSV各主要结构蛋白的单克隆抗体细胞株。 1．抗PRRSV N蛋白单克隆抗体： 本研究用纯化的PRRSV作为免疫原，腹腔注射免疫BALB／C小鼠；3周后腹腔注射等量抗原进行二次免疫；再过2周，相同剂量腹腔注射进行三免；一周后检测小鼠血清效价，达到要求后进行加强免疫，3天后，取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2／0进行融合。经间接ELISA进行杂交瘤筛选，共获得2株能针对PRRSV核衣壳蛋白的特异性单抗，分别命名为4B8、4D8。间接ELISA法检测无血清培养上清McAb效价为1：32～1：128。利用间接免疫荧光(Indirect immunofluorescent assay，IFA)检测单抗特性，结果有特异性荧光，均成阳性。这2株单抗仅与PRRSV发生特异性反应，与常见猪其它病毒如猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒1型以及猪圆环病毒2型均无反应性。以表达的重组N蛋白作为检测抗原进行ELISA，证明该2株单抗针对的是PRRSV N蛋白。 以HIS融合表达的PRRSV重组N蛋白作为免疫原，制备并建立了3株稳定分泌针对猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞2F3、4D5、5D11，其细胞培养上清效价为1：64～1：512，2F3小鼠腹水效价为1：12800。其中2F3的Ig亚类为IgM。ELISA结果显示，3株均与融合表达的HIS-N蛋白反应，而与HIS融合表达