目的:通过观察BV2小胶质细胞系多种炎症介质的表达情况,研究瘦素对于小胶质细胞免疫反应的调节,并探究JAK2蛋白在瘦素调节小胶质细胞免疫反应过程中的意义。方法:通过体外模拟中枢系统中小胶质细胞发生炎症反应时的状态,观察在瘦素干预下小胶质细胞炎症因子表达情况,实验首先通过CCK-8比色法检测不同浓度的脂多糖(LPS)对于BV2小胶质细胞增殖率的影响,以选择出本实验中LPS的适合浓度,再将BV2小胶质细胞按完全随机的方法分成5个小组,每个小组中包含8小瓶培养的BV2小胶质细胞,根据不同的处理方法将这5个小组的小胶质细胞分别设置为:A组为空白对照组、B组为脂多糖组、C组为瘦素组、D组为脂多糖+瘦素组、E组为瘦素+AG490组。分组后将这5组小胶质细胞进行相应处理24h后,采用流式细胞技术(FCM)检测小胶质细胞表面膜分子激活指标白细胞共同抗原CD45、黏附转移指标白细胞共同抗原CD54、增殖指标核抗原Ki-67的表达情况。以及利用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测小胶质细胞凋亡蛋白基因(Fas L)、一氧化氮合酶基因(i NOS)、肿瘤坏死因子基因(TNF-α)三种m RNA片段的表达情况。结果:采用CCK-8比色法检测结果发现,与空白对照组相比,BV2小胶质细胞在不同剂量的LPS(100ng/ml、500ng/ml、1μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)处理培养24h后,BV2小胶质细胞活性呈剂量依赖性降低,5μg/ml和10μg/ml脂多糖对于BV2小胶质细胞活性有明显抑制作用,且差异具有统计学意义(P<0.05),而其他三种不同浓度剂量的LPS(100ng/ml、500ng/ml、1μg/ml)对于BV2小胶质细胞活性无明显抑制作用,且差异具有统计学意义(P<0.05)。采用FCM技术检测结果显示,脂多糖组和瘦素组的白细胞共同抗原CD45和CD54表达量较空白对照组有明显升高,且差异具有统计学意义(P<0.05),瘦素和脂多糖一样都可以刺激小胶质细胞产生炎性因子。而脂多糖+瘦素组的白细胞共同抗原CD45和CD54表达量较脂多糖组有明显下降,且差异具有统计学意义(P<0.05),瘦素降低了脂多糖对于小胶质细胞产生炎性因子的刺激作用。瘦素+AG490组较瘦素组白细胞共同抗原CD45和CD54表达量有所降低,且差异具有统计学意义(P<0.05),实验结果显示JAK2蛋白的特异性阻断剂AG490阻断了瘦素对于小胶质细胞炎症介质白细胞共同抗原CD45和CD54的表达。而5组中增殖指标核抗原Ki-67的表达量在各组间显示无明显差异。采用RT-PCR技术检测结果显示,脂多糖组和瘦素组的细胞凋亡蛋白基因(Fas L)、一氧化氮合酶基因(i NOS)、肿瘤坏死因子基因(TNF-α)三种m RNA表达量较空白对照组都有明显升高,且差异具有统计学意义(P<0.05),实验结果显示瘦素同脂多糖一样可以刺激小胶质细胞产生免疫应答反应并刺激炎症基因的增值表达。脂多糖+瘦素组的细胞凋亡蛋白基因(Fas L)、一氧化氮合酶基因(i NOS)、肿瘤坏死因子基因(TNF-α)三种m RAN表达量较脂多糖组有明显下降,且差异具有统计学意义(P<0.05),实验结果显示瘦素降低了脂多糖对于小胶质细胞产生免疫应答反应并刺激炎症基因的增值表达。瘦素+AG490组较瘦素组细胞凋亡蛋白基因(Fas L)、一氧化氮合酶基因(i NOS)、肿瘤坏死因子基因(TNF-α)三种m RNA表达量有所降低,且差异具有统计学意义(P<0.05),表明JAK2蛋白的特异性阻断剂AG490阻断了瘦素对于小胶质细胞产生免疫应答反应。结论瘦素作用于不同状态的小胶质细胞表现的作用不同,瘦素可以激活静息状态的小胶质细胞使其产生炎性反应,而且瘦素能够抑制脂多糖活化后的小胶质细胞。本次实验表明了,一方面瘦素能够刺激小胶质细胞活化,另一方面瘦素又能使脂多糖活化的小胶质细胞转归到静息状态。瘦素能够刺激小胶质细胞,让小胶质细胞产生多种炎性因子,这一点与脂多糖的作用相似,同时瘦素又能够使脂多糖刺激活化的小胶质细胞产生的炎性因子减少。此外,实验结果显示JAK2蛋白在瘦素刺激小胶质细胞活化的过程中发挥着重要作用。