背景和目的食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,在全世界发病率居第七位,死亡率居第六位。按照组织学类型,食管癌可分为食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）和食管腺癌。ESCC是最具侵袭性的鳞状细胞癌之一,发病率最高的是东亚地区,其次是非洲南部、非洲东部、欧洲北部和中南亚地区。ESCC的发病主要受环境因素和遗传因素的影响。近年来内镜技术的发展使早期ESCC的发现成为可能,内窥镜切除、手术、放疗和化疗等治疗手段的进步,一定程度上提高了ESCC患者的生存率。但是由于患者对化疗药物容易产生耐药,患者的五年生存率仍然只有20%左右,而且已出现转移的患者五年生存率仅为5%。基于目前ESCC的治疗现状,亟需寻求新的安全有效的治疗药物。香叶木素（Diosmetin,DIOS）是一种天然黄酮类化合物,主要来源于金合欢、菊花、柠檬、柑橘等多种植物。DIOS具有抗炎、抗菌、抗氧化等作用,近年来其抗肿瘤作用逐渐受到关注。已有研究发现DIOS在肝癌、结直肠癌、肺癌等肿瘤中发挥抗癌作用,如抑制细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞等。然而,DIOS在肿瘤中的作用机制仍不清楚,其对ESCC的作用尚未见报道。因此,本研究探讨了DIOS对ESCC进展的影响及其机制。顺铂（Cisplatin,CDDP）是临床治疗ESCC的一线药物,但其存在严重的肾毒性。研究发现DIOS具有保护肾组织免受氧化损伤的作用。因此本研究进一步探讨了DIOS与CDDP联合应用能否产生协同增效作用,并减轻CDDP引起的肾毒性,旨在为ESCC的临床治疗提供新的策略。方法（1）探讨DIOS对ESCC进展的影响。通过细胞毒性实验检测DIOS对ESCC细胞及正常食管上皮细胞的毒性作用;通过细胞增殖实验和流式细胞术检测DIOS对ESCC细胞增殖及周期凋亡的影响;利用细胞划痕和Transwell迁移侵袭实验检测DIOS对ESCC细胞迁移、侵袭能力的影响。（2）探讨DIOS抑制ESCC进展的机制。转录组学测序分析DIOS抑制ESCC的信号通路;通过双荧光素酶报告基因实验检测E2F2对RRM2的转录调控,并且检测DIOS对该转录调控过程的影响;利用Swiss Target数据库预测DIOS的可能靶点,通过Pull down实验检测DIOS与CDK2是否结合;通过细胞增殖、流式细胞术和细胞划痕实验检测CDK2抑制剂CVT-313对ESCC细胞的影响,并且检测DIOS对CVT-313预处理后ESCC细胞增殖、周期、迁移的影响;构建ESCC细胞异种移植瘤模型检测DIOS对ESCC生长的影响;采用Western blotting和免疫组化方法检测肿瘤组织中Ki67、CDK2、p-Rb、E2F2及RRM2表达水平的变化;通过体重、内脏指数、组织HE染色评估药物毒副作用。（3）探讨DIOS与CDDP联合用药对ESCC的作用效果。通过细胞增殖实验和流式细胞术检测联合用药对ESCC细胞增殖、周期及凋亡的影响;构建人源性肿瘤异种移植（Patient-derived xenografts,PDX）模型检测DIOS和CDDP联合应用对体内ESCC生长的影响;通过HE染色、q RT-PCR、Western blotting、血清尿素氮和肌酐检测评估药物毒副作用。结果（1）DIOS对ESCC细胞具有显著的毒性作用,而对正常食管上皮细胞毒性较低。DIOS显著抑制ESCC细胞KYSE150、KYSE450和ECa109的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。（2）转录组学分析提示DIOS显著抑制E2F Targets信号通路,而且DIOS处理后变化最显著的差异基因为RRM2。双荧光素酶报告基因实验发现DIOS抑制E2F2对RRM2的转录。此外,分子对接和Pull down实验证实DIOS直接与CDK2结合。应用CDK2抑制剂CVT-313发现抑制CDK2显著抑制ESCC细胞的增殖和迁移,并且证明DIOS通过靶向CDK2抑制ESCC的增殖和迁移。动物实验发现DIOS显著抑制ESCC的生长,而且DIOS的抑瘤效果与CDDP无统计学差异。CDDP存在一定的肾毒性,而DIOS对小鼠的脏器无明显的毒性作用。（3）DIOS与CDDP联合用药显著抑制了ESCC细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。DIOS与CDDP联合用药抑制了PDX模型中ESCC的体内生长,而且DIOS减轻了CDDP的肾毒性。结论DIOS通过CDK2/Rb/E2F2/RRM2信号通路抑制食管鳞癌的进展。DIOS与CDDP联合应用能够显著抑制食管鳞癌的生长,减轻CDDP引起的肾毒性。