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石斑鱼是我国以及东南亚重要的海水养殖鱼类，经济价值极高。近年来，随着石斑鱼养殖密度的提高及海水养殖环境的恶化，多种病原的爆发对石斑鱼养殖业造成了巨大的经济损失。石斑鱼虹彩病毒（Singaporegrouperiridovirus，SGIV）是近年从养殖石斑鱼中分离得到的一种高致病性病原，可导致石斑鱼死亡率达90％以上。Rab7蛋白是存在于真核细胞内的一种小分子GTP酶(GTPase)，其主要功能是在效应分子的协助下，通过GTP结合态（激活态）与GDP结合态（失活态）间的转换，参与细胞内从早期/晚期内吞体到溶酶体阶段的膜泡运输。许多病毒在感染宿主细胞时会利用宿主细胞的内吞途径，介导病毒的内在化及到达复制地点。根据已有的文献报道，Rab7蛋白在多种病毒的感染过程中介导了病毒粒子的运输，如HIV、对虾白斑病毒(WSSV)、委内瑞拉马脑炎病毒(VEEN)。研究发现虹彩病毒通过受体调节的内吞途径或者膜融合的方式进入宿主细胞，但是目前对于虹彩病毒进入和感染宿主细胞的分子机制研究很少。我们针对石斑鱼Rab7蛋白是否作用于SGIV感染过程进行了一系列研究，主要取得以下进展:
1.通过RACE方法从石斑鱼脾组织cDNA中克隆得到Rab7基因完整cDNA序列，命名为Ec-Rab7，生物信息学分析揭示Ec-Rab7基因高度保守，与多个物种Rab7基因的相似度在90％以上，具有GTPaseRab家族的多个保守功能结构域。构建了原核表达重组质粒pGEX-Ec-Rab7，成功地在原核细胞诱导表达了Ec-Rab7的重组融合蛋白，并对其进行纯化，用纯化的重组蛋白免疫小鼠，制备了高效特异的石斑鱼Rab7抗血清。
2.应用RT-PCR对Ec-Rab7基因的组织分布分析揭示，Ec-Rab7基因在石斑鱼各个组织中均有表达且表达量基本一致;利用Real-timePCR检测在SGIV感染石斑鱼以及脾细胞系(GScells)后Rab7基因的表达变化，结果显示Rab7基因在脾脏组织和GS细胞中均发生上调;Ec-Rab7基因在GS细胞中的过表达可以促进SGIV的感染，这些结果提示Ec-Rab7可能参与了SGIV的感染过程。
3.构建pGFP-Ec-Rab7重组质粒转染正常GS细胞显示Rab7蛋白均匀分布在胞质中且与溶酶体存在部分共定位;但是在SGIV感染GS细胞后期出现病毒加工厂时，Ec-Rab7蛋白在病毒加工厂附近有明显聚集。
4.利用Ec-Rab7抗血清进行的体外抗体中和实验表明，与对照的阴性血清相比，Ec-Rab7抗血清可以明显延缓病毒感染引起的CPE(cytopathiceffect)以及部分抑制SGIV结构蛋白ORF072的转录。
5.已有文献报道Rab蛋白在转运过程中与病毒蛋白存在相互作用，因此我们利用了Far-westernblotting结合MDALI-TOF-MS方法寻找可能与Rab7蛋白存在相互作用的SGIV病毒蛋白，实验结果显示Rab7蛋白可能与SGIV的ORF069以及ORF101存在相互作用。