黏着斑激酶(FAK)是一种非受体型酪氨酸激酶，在细胞与细胞外基质相互作用中，通过激活一系列信号通路发挥调节细胞生长、迁移和生存的作用。尽管许多研究都表明，FAK在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用，但是关于FAK在肺癌中促生存、抗凋亡作用机制的研究还很少。 本实验应用光镜观察，Hoechst33342染核、Western Blot、RNA干涉技术等方法研究了FAK对肺癌细胞A549抗失巢凋亡的功能和信号传导通路。polyHEMA是研究失巢凋亡的常规试剂，它通过同性电荷相互排斥来抑制细胞贴壁，促使细胞悬浮生长。A549细胞悬浮培养24h时，经光镜和Hoechst33342染色可见细胞生长状态良好；当FAK被干涉时，Hoechst33342染色出现明显的细胞凋亡现象。用Western blot检测干涉组和对照组，磷酸化SRC、PI3K、ERK、P38(而不是JNK)、CASPASE3的表达水平也明显下降；细胞色素C(CYC)的表达水平增加。为了进一步了解FAK在A549肺癌细胞中抗失巢凋亡的机制，检测了FAK的磷酸化位点和下游信号分子SRC、PI3K/AKT、ERK、JNK、P38的磷酸化水平和CYC、CASPASE3的表达情况。Western Blot结果表明，悬浮不同时间，FAK的Tyr397、Tyr861、Tyr925位点的磷酸化水平随时间变化逐渐升高后降低；FAK下游信号SRC、PI3K/AKT、ERK、P38的磷酸化水平也随时间变化明显升高又降低；CYC、CASPASE3的表达没有明显变化。最后，SRC、MEK1和PI3K的特异抑制剂PP2、PD98059和LY294002分别作用于A549细胞，证实SRC、PI3K和ERK在调节细胞抗失巢凋亡中发挥重要作用。 研究结果表明：FAK的过表达在肺癌细胞抗失巢凋亡中发挥重要作用。且与细胞外基质分离时，FAK可能通过Tyr397、Tyr861和Tyrp925位点的磷酸化，激活FAK-Tyr397-SRC-Tyr925-PI3K-AKT或FAK-TVr397-PI3K-AKT或FAK-MAPK-ERK途径促进肺癌的抗失巢凋亡的功能；可能FAK-MAPK-P38途径也发挥了抗失巢凋亡的功能。