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目的:检测非小细胞肺癌患者中EGFR突变与GST-π的表达情况,分析EGFR突变和GST-π的表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系及预后,探讨EGFR突变、GST-π表达和吸烟因素对非小细胞肺癌的影响。方法:(1)收集南昌大学第二附属医院2010—2012年间手术切除并经病理科确诊为非小细胞肺癌的新鲜标本106例,同时选取距肿瘤边缘>5cm的癌旁组织106例做对照,所有入选患者术前均未接受过化疗或放疗等任何抗肿瘤治疗。(2)采用ElivisionTMplus免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌中EGFR蛋白和GST-π蛋白的表达情况;采用实时荧光定量PCR技术检测非小细胞肺癌中EGFR和GST-π mRNA的表达情况;采用直接测序法检测非小细胞肺癌中EGFR基因第19和21外显子突变位点。(3)对检测结果用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果:1、免疫组化结果:(1)EGFR蛋白1)非小细胞肺癌中EGFR蛋白阳性率为35.8%,癌旁组织EGFR蛋白阳性率为6.6%,组间差异有显著统计学意义(P=0.000);2)EGFR蛋白在非小细胞肺癌中的阳性率:①年龄<60岁患者为40.0%,≧60岁患者为32.8%,组间差异无统计学意义(P=0.444);②男性患者为29.6%,女性患者为56.0%,组间差异有统计学意义(P=0.016);③吸烟患者为23.4%,不吸烟患者为54.8%,组间差异有显著统计学意义(P=0.001);④鳞癌患者为19.2%,腺癌患者为60.0%,腺鳞癌患者为37.5%,大细胞癌患者为16.7%,组间差异有显著统计学意义(P=0.001);⑤有淋巴结转移患者为48.1%,无淋巴结转移患者为31.6%,组间差异无统计学意义(P=0.096);⑥分化程度较高患者为46.4%,分化程度低的患者为16.2%,组间差异有显著统计学意义(P=0.002);⑦临床为Ⅰ期+Ⅱ期患者为43.1%,Ⅲ期患者为27.1%,组间差异无统计学意义(P=0.087);(2)GST-π蛋白1)非小细胞肺癌中GST-π蛋白阳性表达率是42.5%,癌旁组织中GST-π蛋白阳性表达率是10.4%,组间差异有显著统计学意义(P<0.01);2)GST-π蛋白在非小细胞肺癌中的阳性率:①年龄<60岁患者为47.5%,≧60岁患者为35.6%,组间差异无统计学意义(P=0.217);②男性患者为33.3%,女性患者为72.0%,组间差异有显著统计学意义(P=0.001);③吸烟患者为39.1%,不吸烟患者为47.6%,组间差异有统计学意义(P=0.038);④鳞癌患者为30.8%,腺癌患者为62.5%,腺鳞癌患者为57.5%,大细胞癌患者为16.7%,组间差异有统计学意义(P=0.023);⑤有淋巴结转移患者为55.6%,无淋巴结转移患者为37.9%,组间差异无统计学意义(P=0.111);⑥分化程度较高患者为34.8%,分化程度低的患者为56.8%,组间差异有统计学意义(P=0.029);⑦临床为Ⅰ期+Ⅱ期患者为44.8%,Ⅲ期患者为39.6%,组间差异无统计学意义(P=0.587);(3)在106例NSCLC中EGFR蛋白和GST-π蛋白的Spearman相关系数为r=0.194,P<0.05,相关性分析表明EGFR蛋白与GST-π蛋白在非小细胞肺癌中表达呈正相关。2、实时荧光定量PCR结果:(1)EGFR mRNA1) EGFR mRNA在非小细胞肺癌中的表达为8.33(18.62-10.29),癌旁组织表达为5.59(15.67-10.08)组间差异有统计学意义(P<0.05);2)EGFR mRNA在非小细胞肺癌中的表达:①年龄<60岁患者表达4.26±0.27,≥60患者为3.95±0.43,组间差异无统计学意义(P=0.523);②男性患者表达4.14±0.23,女性患者为5.72±0.34,组间差异有统计学意义(P=0.022);③吸烟患者表达为4.96±0.26,不吸烟患者为3.95±0.43,组间差异有统计学意义(P=0.025);④鳞癌患者表达为4.05±0.52,腺癌患者表达为4.13±0.32,腺鳞癌4.23±0.44,大细胞癌患者表达为4.26±0.27,组间差异有显著统计学意义(P=0.003);⑤有淋巴结转移患者表达为2.85±0.25,无淋巴结转移患者为1.93±0.04,组间差异无统计学意义(P=0.296);⑥分化程度较高的患者表达为2.96±0.44,分化程度较低的患者为4.36±1.83,组间差异有显著统计学意义(P=0.004);⑦临床为Ⅰ+Ⅱ期患者表达为4.15±2.03,Ⅲ期患者表达为4.14±2.09,组间差异无统计学意义(P=0.407);(2)GST-π mRNA1) GST-π mRNA在非小细胞肺癌中的表达为11.12(21.41-10.29),癌旁组织表达为8.16(18.24-10.08),组间差异有显著统计学意义(P<0.01);2)GST-πmRNA在非小细胞肺癌中的表达:①年龄<60岁患者表达3.61±0.21,≧60患者为3.91±0.13,组间差异无统计学意义(P=0.748);②男性患者表达4.14±0.23,女性患者为2.74±0.19,组间差异有统计学意义(P=0.041);③吸烟患者表达为4.32±0.27,不吸烟患者为3.75±0.23,组间差异有统计学意义(P=0.037);④鳞癌患者表达为4.65±0.32,腺癌患者表达为4.33±0.14,腺鳞癌3.83±0.44,大细胞癌患者表达为2.26±0.23,组间差异有显著统计学意义(P=0.008);⑤有淋巴结转移患者表达为2.65±0.35,无淋巴结转移患者为3.93±0.74,组间差异无统计学意义(P=0.296);⑥分化程度较高的患者表达为4.96±0.27,分化程度较低的患者为3.26±1.73,组间差异有显著统计学意义(P=0.014);⑦临床为Ⅰ+Ⅱ期患者表达为2.15±0.03,Ⅲ期患者表达为3.94±1.09,组间差异无统计学意义(P=0.757);(3)非小细胞肺癌中EGFR的mRNA含量为癌旁组织中的3.12倍(P<0.05),非小细胞肺癌中GST-π的mRNA含量为癌旁组织中的1.83倍(P<0.05)。3、直接测序结果:非小细胞肺癌中EGFR19号外显子突变数是22例(57.9%),第21号外显子突变数是16例(42.1%);癌旁组织中19号外显子突变数是3例(42.9%),第21号外显子突变数是4例(57.1%);两次测序EGFR第19和21号外显子突变结果比较实验发现,非小细胞肺癌EGFR第19和21外显子突变,结果比较无显著性差异(x2=3.2,p>0.05)。所有测序结果与实时荧光定量PCR检测结果-致,两者一致性达到100%。结论:(1)在非小细胞肺癌中EGFR突变与性别、分化程度、吸烟史、病理类型有关,不吸烟、女性、分化程度较高的腺癌突变型EGFR表达率高,能提高EGFR-TKI抑制剂敏感性;与患者年龄、有无淋巴结转移和TNM分期无关。EGFR突变与肿瘤患者预后密切相关,且为预后不良因素,可作为评估患者预后的临床指标。(2)在非小细胞肺癌中GST-π高表达与性别、分化程度、吸烟史、病理类型有关,不吸烟、女性、低分化、腺癌GST-π高表达,能降低肿瘤对化疗药物的敏感性;与患者年龄、有无淋巴结转移和TNM分期无关。GST-π高表达与肿瘤患者预后密切相关,且为预后不良因素,可作为评估患者预后的临床指标。