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卷象Euops chinesis是一种植食性的小型甲虫,与其宿主植物虎杖(一种中国传统药用植物)间具有很强的专一性作用。雌性成虫将新生卵置于叶片之内卷成叶苞,并将贮存在体内的真菌Pennicillium herquei接种在叶片表面用以保护幼虫的生长发育。研究表明,卷象E.chinesis与P.herquei互惠共生。事实上昆虫和真菌的这种共生关系最早可追溯到4,000-6,000万以前,典型代表包括爱特蚂蚁与真菌Leucoagaricus gongylophorus,白蚁与蚁巢伞菌,松大小蠹与真菌Entomocorticium sp.等。上述共生体系能够有效抵制外界环境的威胁,部分体系通过培养共生细菌分泌活性次级代谢产物实现自我保护。在前期工作中,刘杏忠研究员课题组对采自江西明月山的虎杖空白叶片和叶苞分布的微生物菌落进行了大量的调查与分析工作,发现两者在种类与数量上均有明显的差异。考虑到青霉属真菌可以产生活性广泛的次级代谢产物,Pherquei的存在可能是造成上述差异的重要因素,因此对P.herquei进行化学研究显得十分必要。 本研究基于上述生态学观察与考虑,对卷象E.chinesis的共生真菌P.herquei,卷象幼虫体内真菌Perenniporia sp.,以及宿主植物虎杖的内生真菌Cercosporasp.,进行了放大发酵与粗提物的制备。以活性评价为指导,采用硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相色谱等分离技术手段,对上述三个提取物进行了分离纯化,得到了相应的单体化合物。从P.herquei的发酵产物中发现了一个已知化合物scleroderolide,活性测试结果表明该化合物对与卷象E.chinesis的生存、生长发育相关的真菌、细菌具有显著的拮抗作用。从另外两株相关真菌的发酵产物中共分离纯化了34个化合物,其中26个为新结构。结合质谱、核磁共振及X-ray单晶衍射等多种现代波谱技术,并应用圆二色谱及化学衍生化等方法确定了上述26个新化合物的平面结构及构型。同时,对部分新结构化合物进行了体外抗菌、肿瘤细胞毒以及诱导自噬活性评价。 本研究从次级代谢产物结构与功能的角度着手,以卷象E.chinesis的共生真菌P.herquei、卷象幼虫体内真菌Perenniporia.sp.,以及宿主植物虎杖的内生真菌Cercospora.sp.为对象,初步研究了上述菌株在特定环境中所产生的化合物的结构与活性,并取得了预期的研究结果。本研究取得的一个重要进展是,发现共生真菌P.herquei通过产生抗菌活性的次级代谢产物抑制周围环境中其它菌株的生长,进而可能为幼虫的存活及生长发育提供保障。对卷象幼虫体内真菌Perenniporia sp.与宿主植物虎杖的内生真菌Cercospora sp.的化学研究结果表明,上述特境真菌可以产生结构与活性多样的次级代谢产物,为理解特境真菌的生态学意义以及开发利用提供了依据。