青藤碱对胃癌MGC803细胞增殖的抑制作用及机制探讨

来源 :南华大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:shanlai_lu
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【目的】研究青藤碱对胃癌MGC803细胞增殖的抑制作用并探讨其相关机制。【方法】1.体外培养MGC803细胞,将其分为五组:对照组、SIN组(300、600、900、1200ug/ml),加入药物后培养细胞24、48、72小时,CCK8法检测其OD值,并计算出其对细胞的抑制率。2.体外培养MGC803细胞,将其分为五组:对照组、SIN组(300、600、900、1200ug/ml),加入药物后培养细胞48小时,FCM检测细胞周期,Westernblot检测p21蛋白表达。3.体外培养MGC803细胞,将其分为五组:对照组、SIN组(300、600、900、1200ug/ml),加入药物后培养细胞48小时,FCM检测细胞凋亡,Westernblot检测线粒体和胞浆Cyt C、Bax、Bcl-2、裂解型Caspase-3、Survivn蛋白表达。【结果】1.1青藤碱对胃癌MGC803细胞的抑制率SIN组(300、600、900、1200μg/mL)24小时抑制率分别为(2.25±0.45、7.71±1.70、15.42±3.95、35.75±2.61)%,其中SIN组(600、900、1200ug/mL)高于对照组(P<0.05),SIN组(300ug/ml)无明显差异(P>0.05);SIN组(300、600、900、1200μg/mL)48小时抑制率分别为(10.36±2.82、18.02±1.01、24.36±2.65、40.59±3.18)%,高于对照组(P<0.05);SIN组(300、600、900、1200μg/mL)72小时抑制率分别为(19.57±1.36、26.31±3.34、44.00±3.96、53.25±5.51)%,高于对照组(P<0.05)。2.1青藤碱对细胞周期影响SIN组(300、600、900、1200ug/ml) G1期比率分别为(70.39±0.31、69.22±0.36、83.35±4.02、87.15±2.82)%,高于对照组(61.13±1.22)%(P<0.05);S期比率分别为(20.03±2.22、17.65±1.82、9.87±1.26、9.33±0.82)%,低于对照组(26.46±1.02)%;G2/M期比率分别为(9.57±0.68、8.03±1.06、6.78±1.07、3.52±0.92)%,低于对照组(12.41±1.45)%。2.2青藤碱对p21蛋白表达影响SIN组(300、600、900、1200ug/ml)p21蛋白表达水平分别为(1806±111.70、2610±130.00、2923±150.44、3717±155.03)INT×mm,高于对照组(1573±61.10)INT×mm (P<0.05)3.1青藤碱对细胞凋亡影响SIN组(300、600、900、1200ug/ml)凋亡率分别为(2.49±0.51、4.25±0.67、10.35±1.61、12.82±1.41)%,高于对照组(0.12±0.03)%(P<0.05)。3.2青藤碱对线粒体和胞浆Cyt C、Bax、Bcl-2、裂解型Caspase-3、Survivn蛋白及Bax/Bcl-2比值表达影响SIN组(300、600、900、1200ug/ml)胞浆Cyt C蛋白表达水平分别为(965±47.69、951±73.67、1600±75.50、2136±65.06)INT×mm,高于对照组(633±67.89) INT×mm (P<0.05);线粒体Cyt C蛋白表达水平分别为(981±33.49、831±32.70、644±78.14、660±98.49)INT×mm,低于对照组(1623±135.77) INT×mm (P<0.05);SIN组(300、600、900、1200ug/ml)Bax蛋白表达水平分别为(1314±60.89、1757±70.24、2286±135.0、2557±84.54)INT×mm,高于对照组(794±53.78) INT×mm (P<0.05); Bcl-2蛋白表达水平分别为(2150±105.36、1640±105.35、1009±29.57、714±73.50)INT×mm,其中SIN组(600、900、1200ug/ml)低于对照组(2153±70.50) INT×mm (P<0.05),SIN组(300ug/mL)无明显差异(P>0.05);Bax/Bcl-2比值分别为(0.62±0.05、1.07±0.09、2.27±0.07、3.58±0.25),高于对照组(0.37±0.03)(P<0.05)SIN组(300、600、900、1200ug/ml)裂解型Caspase-3蛋白表达水平分别为(2075±155.93、2523±116.76、3605±168.84、4015±132.57)INT×mm,高于对照组(1621±38.50) INT×mm (P<0.05); Survivn蛋白表达水平分别为(2313±123.42、1857±150.11、1167±150.44、582±151.19)INT×mm,低于对照组(2990±160.93)INT×mm (P<0.05)。【结论】1.青藤碱能够显著抑制胃癌MGC803细胞增殖。2.青藤碱抑制胃癌MGC803细胞增殖与其阻滞细胞G1期有关,其阻滞作用与上调p21蛋白表达有关。3.青藤碱抑制胃癌MGC803细胞增殖与其诱导细胞凋亡有关,其诱导作用与促进Cyt C蛋白从线粒体释放到胞浆、增大Bax/Bcl-2比值、上调裂解型Caspase-3、下调Survivn蛋白表达有关。
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