随着人们对环境问题的重视及认识水平的提高，传统的水质指标已经不能满足人们的需要，生物毒性试验在环境领域的作用将会变得越来越重要。目前，应用于环境领域的毒性测试方法很多，由于微生物具有生长迅速、周期短、测试费用低、同高等动物有着类似的理化特性和酶作用过程，能在短时间内得到可靠的毒性资料的优点，因此被较多地用于毒性检测。生物发光法和硝化速率法是常用的微生物毒性测试方法。虽然这些方法已广泛应用于环境领域，但是这些方法也存在着一些缺陷，所以本论文对这些方法进行了研究，希望能够更好地了解这些方法的特点，并对硝化速率法进行了改进，使其能够更好地用于毒性测试。 在使用发光菌法进行毒性测试时，污水中的某些营养物质会对测试结果产生影响，使得相对发光度大于100％。通过实验发现，CH₃COONa，C₆H₁₂O₆和NH₄Cl等物质能够增强发光菌的发光强度，从而使得水样毒性的测试值偏低；不同营养物质对不同毒性物质的影响程度不同；同一种营养物质在不同浓度下对同一毒性物质的影响程度也不同；毒性物质测试结果所受影响还与混合营养物质的组分有关。此外，测试过程中使用的NaCl在一般情况下不会对水样的毒性产生影响。 使用城市污水厂未驯化硝化污泥进行毒性测试时，由于污泥中存在着两类硝化细菌（Nitrosomonas和Nitrobacter），这两类细菌相互干扰会影响测试结果的准确性。实验证实，使用氨氧化细菌培养基（NH₄Cl 1.15g／L，NaHCO₃ 0.50g／L，K₂HPO₄·3H₂O 0.21g／L，MgSO₄·7H₂O 0.125g／L，NaCl 0.125g／L，FeSO₄·7H₂O 2.5mg／L）对硝化污泥进行驯化，培养温度：25℃±3℃，pH 7.5±0.5，DO约2mg／L，驯化一周后可以富集其中的氨氧化细菌，并淘汰其中的亚硝酸盐氧化细菌，将其用于单一毒性物质的测试可以得到准确的数据，但用于实际污水测试时，也存在水中营养物质影响测试结果的问题。 通过对发光菌法和硝化速率法比较后发现，发光菌法灵敏度＞硝化速率法。但是微生物对毒性物质越灵敏，也越容易受到水中营养物质的影响。