诺西肽产生菌的菌种选育及发酵代谢研究

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本文对诺西肽产生菌Streptomyces actuosus的特性进行了考察,并确定了斜面培养基和分离培养基。经自然分离选出S.actuosus S-19作为诱变出发菌株。对Sactuosus S-19进行诱变方法的考察,UV、NTG的诱变效果显著。S.actuosus S-19经UV、NTG的交替诱变结合自然分离,筛选得到一株稳定的诺西肽突变株S.actuosus 9-3-17,其产量为原始菌株的3倍。 以突变株S.actuosus 9-3-17为对象,根据菌种生长代谢特点考察种子培养基、发酵培养基的碳源、氮源的种类和配比,优化工艺条件。最终获得了适合突变株S.actuosus 9-3-17生长的种子培养基以及有利于产抗的发酵培养基,并且改进了发酵工艺。 在前期工作的基础上,研究了与诺西肽生物合成有关的一些物质。NaCl、豆油、Mg2+、Zn2+、Met和Ser均能使产量提高。经研究:NaCl在维持细胞渗透压的同时能激活淀粉酶的活性,对菌体生长和产物合成有促进作用;豆油参与初级代谢,使菌浓增加,从而使产量提高;Mg2+作为许多酶的激活剂,可使酶活增强、代谢旺盛;Met通过促进次级代谢使产量提高,并很可能是前体物质;Ser则同时促进初级和次级代谢使产量增加。 最终通过薄层色谱、高压液相和质谱检测方法验证了发酵产物为诺西肽。
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