CIDEs对山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积的调控作用研究

来源 :西南民族大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueblacktzb
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
脂滴(lipid droplet,LDs)是细胞内存储脂质的主要亚细胞器,其核心由中性脂质构成,外围为单层磷脂膜,对体内的脂质平衡起重要的调控作用。脂滴的膜上分布有多种蛋白质,能够合成或分解脂滴中的磷脂及中性脂,从而调节脂滴的大小及功能。CIDE(cell death-inducing DFF45-like effectors)家族刚开始被发现时,被认为与细胞凋亡相关,并且因为与DFF45(DNA fragmentation factor,DFF45)的N端结构域高度同源而得名。随着人们不断的研究发现,CIDE家族的蛋白均定位于脂滴表面,能够在脂滴与脂滴之间的接触位点上形成脂滴融合复合物(Lipid droplet fusion complex,LDFC),连通两个脂滴,促进脂滴间的融合,从而调控脂滴的大小。可见,CIDEs在脂质代谢过程也具有重要调控作用。然而,目前有关山羊CIDEs基因功能的研究较少,CIDEs在山羊脂代谢调控中的作用尚不清楚。因此本研究在克隆获得CIDEs基因序列的基础上,以山羊肌内前体脂肪细胞为研究对象,利用过表达和RNA干扰技术探究CIDEs对山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积的调控作用,并通过高通量测序技术探究CIDEs调控山羊肌内前体脂肪细胞的脂质代谢通路。这些结果可为进一步揭示CIDEs基因在山羊脂质代谢中的作用及其调控网络提供理论基础,同时也为进一步研究脂滴形成的分子调控机制提供参考。主要的研究结果如下:(1)克隆获得山羊CIDEB和CIDEC基因序列分别为923 bp和1043 bp分别编码219个和237个氨基酸残基。(2)CIDEs基因在山羊各组织中广泛表达,其中CIDEA在山羊瘤胃中高表达;CIDEB在肝脏中高表达;CIDEC在小肠中有较高水平的表达。CIDEA与DFFB和ELOVL3在瘤胃中的表达量具有极显著正相关性(P<0.01),与DIO2、TMEM26、PRDM16、PLIN1具有显著正相关性(P<0.05)。CIDEB与DFFA和SDR39U1在肝脏中的表达量具有显著正相关性(P<0.05)。CIDEC与PLIN2、GPLD1、ADIPOQ在小肠中的表达量具有显著正相关性(P<0.05)。(3)利用真核表达载体pc DNA3.1成功构建山羊重组表达载体pc DNA3.1-CIDEB和pc DNA3.1-CIDEC,成功筛选到CIDEA、CIDEB和CIDEC基因的siRNA,干扰效率分别达到82.1%、82.3%和88.9%。(4)在山羊肌内前体脂肪细胞中过表达CIDEA后脂滴积累和甘油三酯含量增加,干扰CIDEA后脂肪细胞内脂滴数量减少,甘油三酯含量也显著降低。差异基因分析中筛选到72个差异表达基因,通路富集分析获得2个GO脂代谢相关通路,1个KEGG脂代谢相关通路。RT-q PCR验证结果发现CIDEA能够通过上调脂肪酸及甘油三酯合成和脂滴积累相关基因的表达水平,减少脂质降解相关基因的表达来促进山羊脂肪细胞内的脂质沉积。(5)与CIDEA转染结果一致,过表达CIDEB可以促进山羊肌内脂肪细胞中脂质沉积,干扰CIDEB抑制山羊肌内脂肪细胞脂质沉积。差异基因分析找到了113表达差异基因,获得5个GO脂代谢相关通路,1个KEGG脂代谢相关通路。RT-q PCR验证结果发现CIDEB能够通过上调脂肪酸合成和脂滴积累相关基因的表达,降低脂解相关基因的表达水平来促进山羊脂肪细胞内的脂质沉积。(6)CIDEC过表达及干扰结果也与CIDEA和CIDEB转染结果相似,过表达CIDEC后脂肪细胞内脂滴及甘油三酯均显著增加,而干扰CIDEC后细胞内脂滴和甘油三酯显著减少。差异基因分析发现了252表达差异基因,获得1个KEGG脂代谢相关通路基因。RT-q PCR验证结果表明CIDEC主要通过上调脂肪酸合成和脂滴积累相关基因的表达来促进山羊脂肪细胞内的脂质沉积。构建基因网络图发现SEC14L2、ACOT2、HADHB为CIDEs脂代谢调控网络中的重要因子。以上结果显示,CIDEs可以促进山羊肌内前体脂肪细胞的脂质沉积,SEC14L2、ACOT2、HADHB为CIDEs脂代谢调控网络中的重要因子,这为后续进一步研究CIDEs基因在山羊脂代谢中的调控网络提供参考和理论基础。
其他文献
口译质量研究普遍认为译语不仅应忠实于源语,还应忠实于源语的语体风格。然而已有研究表明,口译一定程度上会改变语言在口语-书面语连续体上的位置,造成语体偏移。而目前关于语体偏移的口译研究主要集中于同声传译和交替传译,视译在该方面的研究仍较少。本研究旨在分析英汉与汉英视译中的语体偏移现象,即视译过程中,译文语体相对于原文语体,出现了不同程度的口语性或书面性偏移。通过定量定性分析的方法,以8名南昌大学外国
学位
我国轨道交通的建设规模迅速扩大,城市的地铁建设越来越密集,地铁运行所引起的动力学响应问题日益突出。本论文以双线地铁隧道为研究对象,建立三维双线地铁轨道-隧道-围岩动力有限元分析模型,采用黏弹性人工边界模拟无限地基的辐射阻尼效应,考虑隧道开挖前的初始地应力状态,在此基础上模拟隧道开挖、隧道支护和轨道系统的铺设过程,然后模拟地铁列车动力荷载,进行动力分析。把数值计算得到数据和现场实测数据进行对比,验证
学位
肖斯塔科维奇是二十世纪重要的作曲家之一,他的创作体裁广泛。创作中有一系列与民间抒情歌曲相关的器乐旋律,也有关于当时时代背景、革命战争的存在,而在这部作品中都有这些因素涉及。在保持他原有的创作风格外,也想通过这部协奏曲解决一些新的问题,为通往新的彼岸而探索道路。这是肖斯塔科维奇创作的重要阶段。所以也是值得研究的一部作品。该曲包含了高深的演奏技巧与复杂的音乐结构。本文通过对乐曲和独奏演奏技术的分析来更
学位
在中国社会女性主义意识逐渐增强的当下,本土也产生了一批颇具社会影响力的女性自媒体。自媒体独立灵活的传播形式,让女性群体可以利用它来传播女性话语、提高女性话语权。相较于其他女性自媒体,本文研究对象“橙雨伞”的特色之处在于其品牌口号为“跨界联合,终止性别暴力”。这句口号确定了“橙雨伞”两大特点:首先,“橙雨伞”依靠伙伴网络而存在;其次,“橙雨伞”的设立初衷决定了其关注议题就是性别暴力。性别暴力是基于个
学位
混凝土作为桥梁工程使用最为广泛的材料,具有强度高、施工难度低和整体性能优良等优点,但因其抗拉强度和抗变形强度较低以及内部微观结构存在孔隙、裂缝等缺陷,在恶劣的桥梁服役环境下,常因受到腐蚀而导致整体力学性能下降,严重影响桥梁长期耐久性和服役寿命。氧化石墨烯因其具有超高力学性能和比表面积作为混凝土增强材料已进行了一系列研究。本文在研究氧化石墨烯对混凝土力学性能的影响基础上,进一步选取冻融循环、硫酸盐侵
学位
为探究90号沥青材料在高海拔地区高速公路下面层应用的可行性,本文以两种90号沥青、一种70号SK基质沥青和一种SBS改性沥青为研究对象,采用试验与理论分析结合的方法,对比研究了不同沥青材料流变性能、低温性能,采用灰色关联度分析了沥青疲劳性能各指标的相关性,验证了90号沥青混合料的路用性能,为90号基质沥青用于高海拔地区沥青路面下面层提供了参考依据。对沥青材料进行三大指标与热-紫外耦合老化试验,再采
学位
目的:探讨单核细胞/淋巴细胞比值(monocyteto lymphocyteratio,MLR)、单核细胞/高密度脂蛋白比值(monocyte to high-density lipoprotein ratio,MHR)、纤维蛋白原/白蛋白比值(fibrinogen to albumin ratio,FAR)与维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者营养不良和
学位
大规模云存储与分布式系统的应用规模如此之广泛,以至于磁盘故障已成常态而非例外。为保护数据免受各种故障的影响,跨磁盘复制数据是最直接的办法。鉴于这样做存储开销过大,一种替代的解决方案是利用MDS码即极大距离可分码作为存储码,将k个信息位与n-k个校验位编成长度为n的字符存储在n个磁盘上。这样的存储方式当然极大地优化了冗余度,但对于一般的MDS码,当一个节点出现故障就需要访问剩余k个完好节点才能恢复它
学位
中老年人多发的脑血管疾病已经成为当今日趋老龄化的社会的重大问题,其往往引起患者偏瘫等运动功能障碍。康复医学研究表明,偏瘫患者接受及时有效的康复训练能够恢复部分甚至大部分运动功能。而大部分的患者在康复早期下肢力量相当孱弱,没有能力进行站立或接受步态训练,但是及早的进行康复运动训练对患者的预后有着至关重要的作用。因此,研究一种适合患者进行早期康复训练的卧式下肢康复训练机器人有着重要的意义。现有康复机器
学位
磁共振成像(MRI)是医学成像等领域的一种重要技术,其主要缺点是数据采集时间长、成像速度不够快。压缩感知磁共振成像(CS-MRI)极大地加快了采集过程,并生成可观的重建图像。深度学习被引入到CS-MRI中,进一步地加快了重建过程,提高了图像质量。近年来,利用二级级联U-net结构作为生成器的生成对抗网络(GAN)被证明在MRI重建中是有效的。然而,以前的级联结构仅限于少数特征信息传播通道,因此可能
学位