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目的:分析乙醇相关的氧化应激反应及调节机制,探讨其与广西原发性肝癌发病及乙醇治疗肝癌反应性的关系。方法:(1)采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对广西地区300例原发性肝癌和292例健康志愿者行病例-对照分析,检测乙醇代谢酶ALDH2和CYP2E1基因型,分析基因—环境、基因—基因相互作用与原发性肝癌发生的关系。(2)采取20例肝癌病人和10例健康人外周血,分选的淋巴细胞作为研究对象,流式细胞术检测不同浓度乙醇暴露下的氧化性DNA损伤标志物8-oxoG水平,同时测定细胞内羟自由基(OH~-)含量、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)水平,了解乙醇暴露下淋巴细胞的氧自由基含量、脂质过氧化损伤水平和其抗氧化能力。同时应用RT-PCR技术检测乙醇暴露下淋巴细胞的乙醇代谢酶和DNA损伤修复酶基因ALDH2、CYP2E1、hOGG1、APE的转录表达,并对其基因进行分型。采用基因组学与毒理学相结合的方法,结合基因型与体外实验功能表型验证影响乙醇相关氧化性损伤的功能性基因型。(3)选取20例行无水酒精注射(PEI)治疗的肝占位病人作为研究对象,测定PEI术前及术后的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,并采用PCR方法检测乙醇代谢酶、DNA损伤修复酶ALDH2、CYP2E1、hOGG1和APE基因型,结合基因型与体内实验功能表型验证影响PEI术后转氨酶的功能性基因型。结果:(1)肝癌组和对照组中ALDH2变异基因型和CYP2E1变异基因型携带者分别占50.3%、48.0%和32.3%和32.9%(P＞0.05)。饮酒频度每周≥3次且携带变异ALDH2~*2和CYP2E1c2基因型者发生肝癌的危险度分别是饮酒频度每周＜3次且携带野生ALDH2~*1和CYP2E1c1基因型者的3.334倍(95%CI=1.746～6.406)和1.803倍(95%CI=0.974～3.336),同时携带两变异基因型者患肝癌风险为1.200倍(95%CI=0.730～1.972),且饮酒增加两变异基因型携带者的肝癌发病风险(OR=1.816,95%CI=0.985～3.348)。HBsAg携带者明显增加肝癌患病风险(OR=30.800,95%CI=14.480～65.513),HbsAg阳性且饮酒频度每周＜3次和饮酒频度每周≥3次者患肝癌危险度分别是HBsAg阴性且不饮酒者的52.617倍(95%CI=21.122～131.070)和72.893倍(95%CI=25.197～210.872)。(2)肝癌组淋巴细胞8-oxoG水平均高于对照组;乙醇干预后,淋巴细胞损伤8-oxoG水平均高于空白组(P＜0.05)。淋巴细胞上清液OH~-含量,随着乙醇浓度的升高而逐渐增加,各剂量组与空白组相比,差异有非常显著性(P＜0.01)。偏相关分析显示8-oxoG水平与OH~-含量呈显著正相关(r=0.9729,P=0.005)。携带野生ALDH2 484Glu或hOGG1 326Ser基因型个体的淋巴细胞DNA损伤高于携带变异ALDH2 484Lys或hOGG1 326Cys基因型的个体,两者之间的差异有统计学意义(P＜0.05)。(3)PEI术后肝转氨酶指标均升高,其中以第一次PEI术后转氨酶升高最为显著(P＜0.05),第三次PEI以后的转氨酶改变逐渐趋缓,但仍高于术前。前三次PEI术后的ALT,ALDH2~*1基因型组显著高于ALDH2~*2基因型组(P＜0.01),第一和第三次PEI术后的AST,ALDH2~*1基因型组高于ALDH2~*2基因型组(P＜0.05和P＜0.01)。CYP2E1c2基因型组,PEI术后的转氨酶均高于c1基因型组,尤其第四次和第五次PEI术后的ALT和第二次PEI术后的AST显著升高(与c1基因型组相比,P＜0.05)。结论:(1)单一易感基因ALDH2或CYP2E1的基因型与肝癌易感性无关;高频饮酒(饮酒频度每周≥3次)且携带变异ALDH2 484Lys或CYP2E1 c2基因型者患肝癌的风险增加,且两变异基因的单倍体者增加肝癌发病风险。HBV感染是肝癌发病的最主要因素之一,饮酒显著增加HBsAg携带者的肝癌风险。提示对于变异基因ALDH2~*2或和CYP2E1c2携带者而言,高频饮酒是一个重要的危险因子;乙醇在增加肝癌发病风险的过程中存在基因—环境和基因—基因相互作用。(2)低浓度乙醇暴露后的淋巴细胞损伤主要由乙醇诱导产生过多的OH~-所致。低浓度乙醇暴露后的淋巴细胞8-oxoG水平与代谢酶ALDH2和修复酶hOGG1基因型相关。携带ALDH2 484Glu或hOGG1 326Ser基因型者,乙醇暴露后的淋巴细胞DNA损伤程度较重。(3)PEI术后转氨酶呈先升高再降低的变化趋势,以第一次PEI术后转氨酶升高最为显著。野生型ALDH2 484Glu或突变型CYP2E1c2基因携带者PEI术后的肝损伤程度较重。