α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞生物学行为的影响

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前言 卵巢癌在妇科恶性肿瘤中死亡率最高。发病原因不清,缺乏早期诊断方法,晚期者治疗效果差,愈后不佳。侵袭、转移是影响愈后,导致死亡的主要原因。所以阐明转移机制对于预防转移、指导治疗有着重要意义。上皮性卵巢癌中75%出现Lewis y不同程度的过量表达;对于作为上皮性卵巢肿瘤标记物CA125结构的研究结果表明,其中含有Lewis y结构,说明Lewis y与上皮性卵巢癌有关。本研究将外来人α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,α1,2-FT)基因转入卵巢癌细胞内使其表达,建立α1,2-FT及Lewis y高表达细胞株为了研究糖链的生物学作用提供了卵巢癌细胞模型。 通过各种生物化学、免疫学等研究方法,研究α1,2-FT基因对卵巢癌细胞生物学特性的影响。探讨Lewis y抗原与恶性肿瘤发生、浸润和转移的关系。 材料与方法 一、材料: 1.细胞系、质粒及菌株: 质粒pcDNA3.1(-),含有α1,2-FT基因真核表达重组体HFUT-H,人卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ,均由中国医科大学妇产科教研室林蓓教授惠赠。 2.主要试剂: 超纯质粒提取试剂盒,质粒转染试剂盒,G418,鼠抗人Lewis y单克隆抗体,SABC试剂盒,DMSO,DMEM,胎牛血清。 二、实验方法:
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