论文部分内容阅读
植物内生放线菌是重要的药用微生物资源，老簕革是一种药用红树林植物，在民间一直以来作为传统药用植物使用。从广东深圳、湛江，海南东寨港、清澜港、广西北海五个地点采集了老鼠簕全株样品，通过乙醇、氯化汞对样品进行表面消毒，选用Gause、RH、SM2、M5、OAS、OA7、OA9、OA11和1/10ATCC172等九种分离培养基，结合放线菌酮、制霉菌素、新生霉素、萘啶酮酸和重铬酸钾等五种抗生素或抑制剂，对每个样品根、茎、叶、花、果等五种组织部位进行了内生放线菌的分离。结果总共分离得到了52株内生放线菌，以根为分离材料得到的菌株数量最多，未从花和果上分离出；用OA7和1/10ATCC172两种分离培养基分离得到的菌株数量最多；以海南清澜港采集的植株材料分离获得的菌株数最多。
检测了所有52株菌株的体外抗菌活性和细胞毒活性，结果显示5株具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性，占总菌株数的9.6％;有2株具蛋自酪氨酸磷酸酯酶抑制剂活性，占总数的3.8％；有1株对结肠癌HCT116细胞株具有细胞毒活性，占总菌株数的1.9％。以根为材料分离得到的活性菌株数最多，以海南清澜港采集的材料分离获得的最多。所有测试菌株均未检测到抗白色念珠菌活性。通过对所有菌株进行耐盐性试验发现，有18株的最大耐盐度能够达到20％，有12株的最适耐盐度为3.3％，有4株不能在0％却能在3.3％或以上生长，有3株菌株不能在3.3％以上生长。
对分离到的所有菌株进行了菌落形态、培养特征、细胞壁氨基酸、全糖分析和16SrDNA部分序列分析，分类鉴定到属。本研究分离得到的内生放线菌分为3个属，分别为小单孢菌属(Micromonospora)、疣孢菌属(Verrucosispora)和链霉菌属(Streptomyces)，其中以小单孢菌最多。
基于16SrDNA部分序列对所有菌株进行了系统发育树分析，结果表明，来自海南清澜港的菌株多样性最丰富，广东湛江的多样性最低。在分离的菌株中，发现有些相同的小单孢菌属菌株分别可从不同地点的老鼠筋植株或同一植株的不同组织分离到。