肝素钠(Heparin sodium)是一种硫酸氨基葡聚糖的钠盐,具有抗凝血作用,是需要迅速达到抗凝作用的首选药物,被广泛用于治疗静脉血栓和预防凝血。2008年爆发的“肝素钠事件”暴露出肝素钠的药品标准存在严重漏洞。经调查,大量掺杂了多硫酸软骨素(Over-sulfated chondroitin sulfate, OSCS)的肝素钠污染品是造成病患出现了过敏反应和其他副作用的主要原因。由于多硫酸软骨素的结构、电荷密度、分子量、抗凝活性均与肝素钠十分相似,如何快速和准确测定肝素钠中的多硫酸软骨素和硫酸皮肤素(Dermatan sulfate, DS)等杂质,是提高该药品检测水平的关键,也是提高肝素钠用药安全性的关键。因此本文首先对2008年以来各国药典及文献报道的肝素钠有关物质的检测方法进行了比较系统的研究,建立了以新的阴离子交换HPLC检测方法,优化了阴离子交换HPLC法的各种色谱条件,并对新方法进行了包括分离度、重复性和耐用性等的方法学验证,确立了肝素钠中的OSCS和DS的检测限和定量限,应用该方法对肝素钠相关产品进行检测,不仅可以准确测定肝素钠粗品、原料药和制齐中的OSCS和DS,还可以准确测定低分子量肝素钠(LMWH)、依诺肝素钠原料药和制剂中的OSCS,新方法切实可行,有望应用到新的药典标准中。将新的弱阴离子交换HPLC法与毛细管电泳(CE)、核磁共振(NMR)这两种OSCS的测定方法进行比较研究。从方法可靠性、简便性、经济可行性等指标分别考察。提出了WAX-HPLC法是一种适合中小厂家规模的分析方法。为了快速测定肝素钠在制备过程中的效价变化,还优化开发了天青A双波长分光光度法。以天青A作为显色剂,以酶标仪代替分光光度计,达到快速测定肝素钠效价目的的同时,也可以减少样品和试剂的用量。与羊血浆法测定结果相差±4U/mg以内。