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目的本文采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)、高效阴离子交换色谱-单四级杆质谱法(HPAEC-MS)和超高效液相色谱-串联四级杆质谱法(UPLC-MS/MS)三种分析方法对螺旋藻活性成分螺旋藻多糖组成及含量进行了研究。探讨螺旋藻的活性成分组成,建立快速、准确、灵敏的测定方法。对螺旋藻中主要活性成分螺旋藻多糖进行提取并对提取工艺条件进行优化。对市售螺旋藻粉、螺旋藻片、螺旋藻胶囊三个常见剂型从单糖组成及含量、微量元素组成及含量、重金属元素组成及含量三个方面进行质量评价及安全性研究,旨在为螺旋藻多糖活性研究提供理论依据,为螺旋藻活性成分的鉴定、制剂的质量研究奠定基础,为螺旋藻产品的研制、开发和使用提供依据。方法HPAEC-PAD方法采用CarboPac PA20色谱柱分离13种糖类化合物,去离子水、NaOH和NaAC三元梯度洗脱,积分脉冲安培检测器检测,选用糖的四波形电位采样;HPAEC-MS方法采用CarboPac PA20色谱柱分离,去离子水、NaOH和NaAC三元梯度洗脱,质谱检测器检测;UPLC-MS/MS方法采用Acquity BEH Amide色谱柱分离,电喷雾负离子多反应检测模式分离13种糖类化合物;螺旋藻多糖经超声辅助提取,响应面优化法筛选最佳提取工艺;螺旋藻多糖经三氟乙酸水解,Sevage试剂(正丁醇:氯仿,4:1,v/v)除蛋白,On Guard II RP固相萃取小柱除脂净化;螺旋藻制剂经HPAEC-PAD方法测定多糖中单糖组成及含量;螺旋藻制剂经微波消解后电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定微量元素及重金属含量。结果HPAEC-PAD方法采用CarboPac PA20色谱柱,去离子水、0.1 mol/L NaOH和0.4 mol/L NaAC三元梯度洗脱,流速0.45 mL/min,柱温30°C,进样量25μL;HPAEC-MS方法采用CarboPac PA20色谱柱,去离子水、0.1 mol/L NaOH和0.4 mol/L NaAC三元梯度洗脱,流速0.45 m L/min,柱温30°C,进样量25μL,选择离子扫描模式检测;UPLC-MS/MS方法采用Acquity BEH Amide色谱柱,10 m M甲酸铵溶液和含10 mM甲酸铵-乙腈溶液梯度洗脱,柱温30°C,进样量5μL,流速0.2 m L/min。螺旋藻多糖经超声波辅助提取后,在单因素实验结果基础上,响应面实验优化的螺旋藻多糖最佳提取条件为超声温度55°C,超声时间45 min,液料比为30 mL/g。按照最佳提取工艺提取,除脂除蛋白净化后的螺旋藻多糖含量为4.336%(mg/g)。通过螺旋藻多糖单糖组成及含量、微量元素及重金属元素含量对螺旋藻的30个样品三种剂型(螺旋藻粉、螺旋藻片和螺旋藻胶囊)进行质量评价,96%样品中均含有葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、果糖、核糖,个别样品中含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。它们的含量在0.343~889.4 mg/g之间。8个共有峰组分含量大小分布依次为:葡萄糖>鼠李糖>半乳糖>阿拉伯糖>木糖>岩藻糖>果糖>核糖。每种剂型单糖组成及含量均相差较大。经ICP-MS测定的微量元素Li、Cr、V、Mn、Co、Cu、Zn、Se、Ni含量在0.472~609.93μg/kg,三种重金属元素As、Cd、Pb含量在0.33~32.88μg/kg之间,其中微量元素Mn含量最高,重金属元素Pb含量最高。三种剂型螺旋藻粉微量元素含量较高,螺旋藻片重金属含量较低。结论建立的13种常见糖类化合物的HPAEC-PAD、HPAEC-MS、UPLC-MS/MS三种分析方法灵敏度高、简单、快速、准确、特异性强。可为糖类化合物的测定提供技术支持。响应面法优化的超声辅助提取螺旋藻多糖的提取工艺,操作简单、快速,适用于植物多糖的提取。ICP-MS方法测定螺旋藻制剂微量元素及重金属元素结果准确、可靠。糖含量及元素测定结果可为螺旋藻的质量评价提供理论依据,为螺旋藻产品质量标准的建立提供依据,为螺旋藻安全性评价提供参考。