【摘 要】
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旧的]检测神经胶质瘤患者血红素加氧酶(HO)的表达,分析其在疾病发病中的意义。进一步探讨HO-CO系统与胶质瘤细胞增殖、凋亡的关系。[方法](1)荧光实时定量RT-PCR法检测神经胶
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旧的]检测神经胶质瘤患者血红素加氧酶(HO)的表达,分析其在疾病发病中的意义。进一步探讨HO-CO系统与胶质瘤细胞增殖、凋亡的关系。[方法](1)荧光实时定量RT-PCR法检测神经胶质瘤组织HO-1mRNA的表达。(2)培养神经胶质瘤细胞U251,将HO-1诱导剂(Hemin)和抑制剂(ZnPP),分别加入U251培养体系,荧光实时定量RT-PCR法检测各组HO-1mRNA的表达,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA方法检测各组培养液上清VEGF、IL-1β、TNF-a表达水平。(3)计量数据以均数±标准差(X±S)的形式表示。统计软件使用spss11.5软件包中的单因素方差分析、Newman-Keuls检验、Spearman等级相关检验,检验水准α=0.05。[结果](1)胶质瘤临床标本中HO-1mRNA的表达水平明显升高(P<0.01)。(2)给予Hemin各组U251细胞中,HO-1mRNA的表达均高于未给药组,差异均有统计学意义(均P<0.05); Hemin浓度1μmol/L组和浓度5μmol/L组差异无统计学意义,Hemin浓度10μmol/L组高于其他组(均P<0.05),HO-1mRNA表达水平和Hemin浓度呈正相关(rs=0.763,P<0.02)。(3)给予ZnPP各组U251细胞中HO-1mRNA的表达均低于未给药组,差异均有统计学意义(均P<0.05); ZnPP浓度1μmol/L组和浓度5μmol/L组差异无统计学意义,ZnPP浓度10μmol/L组低于其他组(P<0.01；P<0.05；P<0.05), HO-1mRNA表达水平和ZnPP浓度呈负相关(rs=0.695,P<0.02)。(4)给予Hemin各组增殖增强,克隆形成能力加强,抑制凋亡(均P<0.05)。给予ZnPP各组增殖减慢,克隆形成能力下降,促进凋亡(均P<0.05)。(5)给予ZnPP各组U251细胞VEGF、IL-1β表达水平下降,TNF-a表达水平升高(均P<0.05)；给予Hemin各组U251细胞VEGF、IL-1β表达水平升高,TNF-a表达水平下降(均P<0.05)。[结论](1)神经胶质瘤患者肿瘤组织HO-1mRNA的表达高于正常对照组,HO-CO系统在细胞增殖中发挥着重要的作用。(2)下调HO-1表达能明显改善肿瘤微环境,抑制了肿瘤细胞恶性增殖,促进了肿瘤细胞凋亡。HO能通过促进胶质瘤肿瘤细胞的增殖、抑制凋亡,影响肿瘤微环境关键细胞因子的表达,促进胶质瘤的发生、发展,对阐明胶质瘤发病机制和探索有效治疗新途径有着重要的意义,可以成为胶质瘤诊断、治疗的新靶点。
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