肺炎克雷伯菌耐药性分析与碳青霉烯类耐药基因研究

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目的:收集重庆医科大学附属大学城医院2013-2018年间从临床标本分离所得的肺炎克雷伯菌,筛选出对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的菌株(CRKP),对其耐药机制及耐药基因进行研究和检测,为临床合理用药提供依据,为监测CRKP的耐药性变化提供数据支持。方法:收集重庆医科大学附属大学城医院2013-2018年间临床分离所得381株肺炎克雷伯菌,使用全自动微生物分析仪及药敏纸片扩散法筛选出CRKP。使用改良Carba NP试验从CRKP中筛选出能够产碳青霉烯酶的菌株。对耐药菌株进行受体菌质粒接合试验,研究耐药基因的水平传播性。最后利用PCR法扩增相应耐药基因,对PCR产物进行测序及比对分析。结果:从临床标本中共收集筛选出11株CRKP,其中大部分菌株对美罗培南、亚胺培南、厄他培南均耐药。改良Carba NP试验显示有6株菌株产酶表型为阳性,分别为A类、B类酶。受体菌质粒接合试验显示耐药基因可从供体菌转移至受体菌,具有水平传播性。PCR法对耐药基因进行扩增,测序结果与基因库比对后结果显示,其中4株菌株携带KPC基因,1株携带NDM基因,1株携带VIM基因。结论:致病菌产生碳青霉烯酶是造成耐药菌出现的一个重要原因,也是细菌主要耐药机制之一。研究结果表明,从该医院收集所得产酶CRKP主要携带KPC、NDM基因以及VIM基因,且可通过质粒接合试验将耐药基因水平转移至受体菌,提示该类耐药基因存在一定传播风险。耐药菌的出现为临床抗感染治疗带来了许多棘手的问题。而如何避免越来越多耐药菌的产生,则需要临床合理用药以及院感部门定期监测耐药数据的共同努力。
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