犬瘟热（canine distemper, CD）是由犬瘟热病毒（Canine distemper virus, CDV）感染引起的一种急性、热性、高度接触传染性疾病；是当前对养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业危害最大的动物传染病之一。　　 本研究根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白（NP）基因序列设计套式PCR引物，建立RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明，该方法可特异扩增出CDV NP基因片段，但其它RNA病毒狂犬病病毒（RV）、DNA病毒犬细小病毒（CPV）以及正常Vero细胞中均未扩增出目的基因。敏感性试验表明，RT-PCR可以扩增10-3 稀释度的病毒RNA，而本研究建立的RT-nested PCR可以扩增10-6 稀释度的病毒RNA，后者的敏感性明显高于前者。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV病料的检测结果表明，本研究建立的检测方法，可以有效的检测CDV感染，适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。　　 本研究将患病犬组织研磨上清接vero细胞，盲传5代后出现细胞病变，RT-nestedPCR方法检测收获的冻存细胞裂解上清。细胞病变为细胞拉伸拉长，出现空泡，有的局部细胞明显收缩脱落。PCR产物电泳出现特异性目的条带，测序结果显示为CDV的特异性核酸序列。与病料中的测序结果进行比对，同源性为100%，说明病料接入细胞后，未产生核酸的突变。初步获得犬瘟热病毒石河子株细胞接毒物。　　 本研究根据GenBank上公布的CDV核衣壳蛋白和血凝蛋白基因序列，设计引物，扩增出CDV石河子株的核衣壳蛋白和血凝蛋白基因序列，进行序列比对分析。结果表明，扩增核衣壳蛋白基因为1688bp，完整的开放阅读框（ORF）为1572bp，编码 523aa，与XJ-5(HM596313)的氨基酸同源性为（100%），但核苷酸的差异为不同位置的2个碱基。扩增血凝蛋白基因为607bp，编码202aa；与TN株（AY390347）氨基酸同源性为98.02%，与日本KDK-1株（AB025271）氨基酸同源性96.05%。序列分析结果认为，CDV石河子株属于亚洲Ⅰ型。　　 本研究预测CDV石河子株NP基因ORF编码蛋白二级结构，分析其抗原表位，设计双酶切引物，构建原核表达载体并进行表达。结果表明，核衣壳蛋白存在明显的抗原表位，成功构建表达载体。优化条件，SDS-PAGE分析结果显示，1mmol/L IPTG诱导8h，可获得最佳表达，分子量为24.9KDa，与预计蛋白分子量一致。为下一步的目的蛋白纯化、NP免疫特性、结构与功能奠定基础。　　 总之，本研究从分离犬瘟热病毒入手，分析CDV石河子株核衣壳蛋白和血凝蛋白基因系统进化关系，成功构建原核表达载体并获得表达，得到目的蛋白，为研究CDV核衣壳蛋白的免疫原性、结构和功能关系的奠定基础。