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本文从梅花鹿茸中提取分离得到梅花鹿茸总多肽(VAPs),多肽含量在64.7%。首次研究了VAPs对大鼠实验性肝纤维化的治疗和逆转作用。初步探讨了其可能的作用机制:通过提高机体对自由基的清除能力,保护肝细胞,改善肝功能,从而减少肝纤维化发生发展的始动因素;通过促进肝细胞再生,修复肝细胞损伤,减轻肝纤维化病变;通过下调肝组织中TGF-β1蛋白的表达干预肝纤维化进行;通过增加Ⅰ、Ⅳ胶原的降解,减轻肝窦毛细血管化,改善肝脏的微循环;通过下调MMP-2的基因表达,改善HSC等多种细胞生存的内环境,减少HSC活化,同时下调TIMP-1基因表达,加强细胞外基质降解。本实验首次从梅花鹿茸中分离纯化得到一个由32个氨基酸残基组成的直链天然多肽化合物(nVAP),与已知蛋白的同源性远远小于50%,提示其可能是源于鹿茸的一个新的多肽类化合物;在离体细胞水平上,观察到nVAP有很强促人胚肝细胞株L-02和大鼠脾细胞增殖的生物活性,并且能有效保护CCL4诱导的L-02细胞脂质过氧化性损伤。提示,nVAP很可能是鹿茸总多肽中抗肝纤维化的主要成分之一。本实验首次成功构建了nVAP原核表达工程菌PET-28a/VAP-BL21(DE3),完成了nVAP在原核表达系统中的高效表达与分离纯化,得到了重组鹿茸多肽(rVAP),且rVAP同样具有促进人胚肝细胞株L-02和大鼠脾细胞增殖的生物活性,克服了从鹿茸中提取nVAP产率低,成本高的缺点。以上的研究工作为鹿茸多肽的应用和深入研究提供了一定的理论和物质基础。