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目的：筛选和鉴定新的有价值的日本血吸虫疫苗候选分子，为天然分子多价复合疫苗的制备提供实验依据。本论文对日本血吸虫不同靶分子量大小的天然抗原分子进行了分离纯化与鉴定，针对SjAWA18kDa分子抗原进行免疫生化特性研究，并比较了SjAWA18kDa天然分子抗原及其相关编码候选基因SJCWL01DNA免疫小鼠产生的抗血吸虫病免疫保护效果。方法：1采用柱层析方法和SDS-PAGE结合凝胶洗脱分离纯化日本血吸虫成虫(SjAWA)和未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)，SDS-PAGE结合银染色、考马斯亮兰染色进行分析鉴定。2采用多途径免疫法制备SjAWA18kDa纯化抗原的单特异免疫血清，以此为探针进行免疫学分析。3将筛选尾蚴cDNA文库获得的新基因(编码18kDa蛋白，命名为SJCWL01，GENBANK登录号为AY855919)克隆入真核表达载体pcDNA3，经PCR、限制性酶切筛选和鉴定阳性克隆。将pcDNA3／SJCWL01质粒转化大肠杆菌DH5α、大量制备DNA疫苗；将该天然分子抗原编码候选基因与SjAWA18kDa免疫小鼠，然后经腹部皮肤感染40±1条日本血吸虫尾蚴，45天后剖杀，计算减虫率和减卵率。采用免疫组化法检测重组DNA疫苗SJCWL01在局部肌肉组织中的表达。结果：1通过柱层析法或SDS-PAGE结合凝胶洗脱得到了五种不同大小血吸虫分子抗原SjAWA18kDa，SjAWA26／28kDa，SIEA42kDa，SIEA130kDa，SjAWA14kDa。2成功制备了抗日本血吸虫18kDa单特异兔血清，SjAWA18kDa与新基因编码的重组融合蛋白有共同的抗原表位。免疫组化显示SjAWA18kDa主要定位于成虫的肠上皮、表皮和实质细胞。3将SJCWL01基因亚克隆至pcDNA3，然后，转化大肠杆菌，大量制备纯化的重组质粒DNA(pcDNA3／SJCWL01)；以此重组DNA和SjAWA18kDa天然分子免疫小鼠，分别获得了27.6％，30.7％减虫率，39.5％和50.7％减卵率。免疫组化结果显示SJCWL01在小鼠骨胳肌的细胞浆中得到表达。结论：1实验证明柱层析法或SDS-PAGE电泳切胶、结合凝胶洗脱是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法。2成功制备了抗SjAWA18kDa血清，SjAWA18kDa主要定位于成虫的肠腔和实质细胞。3成功构建了天然分子抗原编码候选基因(18kDa)DNA疫苗，该疫苗与SjAWA18kDa可诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。