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氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)是致动脉粥样硬化(AS)的关键因素。ox-LDL引起的内皮细胞功能障碍被认为在动脉粥样硬化及其并发症的发生发展中有重要的作用。内皮细胞凋亡是内皮细胞损伤的一种表现形式,有证据表明:ox-LDL能诱导血管内皮细胞凋亡,但其机制尚未阐明。肿瘤坏死因子配体相关分子1A (TL1A)是新近发现的肿瘤坏死因子超家族的成员,是血管内皮细胞特异性抑制因子,其基本作用是引起内皮细胞凋亡。本实验观察ox-LDL对人脐静脉内皮细胞(HUVECs) TL1A表达的影响,研究TL1A在ox-LDL所致血管内皮细胞凋亡中的作用。目的观察ox-LDL对人脐静脉内皮细胞(HUVECs) TL1A表达的影响,探讨TL1A在ox-LDL所致血管内皮细胞凋亡中的作用。方法RT-PCR、Western Blotting方法检测不同浓度(0、20、40、60、80μg/ml) ox-LDL与HUVECs细胞共同孵育24h以及40μg/ml ox-LDL培养HUVECs 0、6、12、24、48h,TL1A在内皮细胞中的表达情况。将5.6mmmo/L DMEM培养基正常组作为正常对照(Control),以纯化重组人TL1A(50ng/ml)蛋白作为内源性TL1A的对照,以及40μg/ml ox-LDL培养的HUVECs中不加人或加入不同浓度的TL1A单克隆抗体(1,3,9μg/ml),24h分析各实验组内皮细胞凋亡情况,采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色观察细胞凋亡形态,Annexin V/PI双染色流式凋亡计数以及检测Caspase-3活性。结果结果显示40μg/ml ox-LDL培养的HUVEC时,内皮细胞中TL1A mRNA和蛋白质的水平表达最高。采用40μg/ml ox-LDL培养HUVECs细胞0、6、12、24、48h,内皮细胞中TL1A mRNA和蛋白质均呈时间依赖性上调。培养液中同时加入anti-TL1A Ab和ox-LDL(40μg/ml)处理HUVECs 24h与仅加入ox-LDL(40μg/ml)相比,呈核固缩及黄染的内皮细胞数量明显减少,HUVECs凋亡率随着抗体浓度的增加从(17.67±2.69)%下降到(5.01±1.44)% (P <0.05),Caspase-3的活性也随着anti-TL1A Ab浓度的增高而下降。结论1. ox-LDL可诱导体外培养的人血管内皮细胞TL1A高表达2. TL1A在ox-LDL诱导人血管内皮细胞凋亡起着重要作用