观察在嗅觉训练中神经生长因子对嗅觉障碍小鼠疗效的实验研究

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目的:针对不同途径神经生长因子(NGF)联合嗅觉训练对嗅觉障碍小鼠疗效分析。方法:(1)实验分组:选取6-7周龄的SPF级BALB/c雄性小鼠49只,按随机数字表法分为嗅觉训练联合NGF雾化组(A组)、嗅觉训练联合NGF肌肉注射组(B组)和单纯嗅觉训练组(C组),其中A、B组为实验组,每组各19只。C组为对照组,11只。(2)制作嗅觉障碍动物模型:A、B、C三组小鼠均腹腔注射浓度为15mg/ml,剂量150mg/kg的3-甲基吲哚(3-MI)。(3)实验干预:三组小鼠均在造模后第1天使用4种不同水溶性嗅素(玫瑰精油、柠檬精油、丁香精油、桉叶油醇)进行经鼻雾化吸入,30min/种嗅素,2次/天。A组在嗅觉训练基础上增加雾化浓度为15μg/ml,调整剂量为45.5μg/kg的NGF。B组在嗅觉训练基础上增加肌肉注射浓度和剂量与A组相同的NGF,均1次/天。C组未行NGF药物干预。共训练28天。分别于造模前及造模后的第7、14、28天行觅食实验,根据觅食时间对比分析小鼠嗅觉恢复情况。于四周后处死各组小鼠取嗅黏膜,通过免疫组化检测小鼠嗅觉标记蛋白(OMP)数量,从形态学角度进一步客观评估嗅觉功能恢复情况。结果:(1)觅食时间比较:在造模后第7天、14天、28天时A组觅食时间均小于对照组,P<0.05。B组在第14天及第28天时觅食时间小于对照组,仅第28天时与对照组相比P<0.05。A组觅食时间在第7天、14天、28天均小于B组,A、B组间对照仅第7、14天时差异具有统计学意义,P<0.05,第28天时差异无统计学意义,P=0.063。(2)OMP数量比较:A、B组小鼠嗅黏膜下OMP阳性细胞数量均高于对照组,P<0.05,A组OMP阳性数量高于B组,但差异无统计学意义,P>0.05。结论:雾化或是肌注联合嗅觉训练与单一嗅觉训练相比能更好的帮助小鼠恢复嗅觉功能,提示NGF有助于恢复3-MI所致的小鼠嗅觉障碍,加快嗅神经元修复和嗅上皮再生。经鼻雾化方式疗效明显,而经肌肉注射药物起效慢。
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