论文部分内容阅读
目的：通过建立肺腺癌动物模型，测移植瘤组织中VEGF、VEGFR、HIF-1α及MVD的表达情况，探讨达肝素钠抗血管形成及抑制肿瘤生长转移的可能作用机制，为达肝素钠作为一种新的抗肿瘤药在临床中治疗肺癌提供实验依据。方法：1.肺腺癌A549细胞传代培养，收集对数生长期A549肺腺癌细胞，调整细胞悬液浓度为1.0×10~7个/ml。2.建立A549肺腺癌动物模型：将A549细胞接种于裸鼠右背部皮下，成功建立肺腺癌动物模型后，将24只荷瘤鼠随机分为四组，即对照组：0.9%NS0.2ml/只，腹腔注射，每天一次，连续35天；顺铂组：3mg/kg，腹腔注射，每天一次，连续3天；达肝素钠组：1500IU/kg，腹部皮下注射，每天一次，连续35天；联合组：腹腔注射顺铂3mg/kg，每天一次，连续3天，同时，腹部皮下注射达肝素钠1500IU/kg，每天一次，连续35天。定期测量鼠体重、瘤体最大直径及最小直径，计算瘤体积、绘制肿瘤生长曲线。第35天，用戊苯巴比妥钠全身麻醉处死荷瘤鼠，剥取瘤体称重、计算抑瘤率。3.免疫组化法：测瘤体组织中VEGF、VEGFR、HIF-1α及MVD的表达情况，HE染色法观察瘤体局部浸润程度及有无远处转移情况。结果：1.对照组、化疗组、达肝素钠组、联合组的末次测量移植瘤体积分别为：(945.086±180.745)mm~3、（688.530±123.276）mm~3、（497.826±89.954）mm~3、（289.825±56.572）mm~3；移植瘤重量分别为：（1.267±0.296）g、（0.602±0.148）g、（0.476±0.098）g、（0.242±0.071）g；抑瘤率分别为：0、52.821%、62.696%、81.035%。；微血管密度（MVD）分别为：（47.000±13.236）个/400倍视野、（36.667±7.581）个/400倍视野、（34.333±5.989）个/400倍视野、（29.000±3.873）个/400倍视野；2.免疫组化检测结果显示：与NS组相比，达肝素钠组瘤组织中VEGF、VEGFR、HIF-1α表达均明显降低，微血管密度明显减少，联合组的抑制效果更为明显，差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论：1.达肝素钠抑制肿瘤组织VEGF、VEGFR的表达，通过VEGF旁分泌途径，抑制新生血管内皮细胞增殖，从而达到抗血管生成的生物学作用。2.达肝素钠可通过下调HiF-1α的表达，间接抑制VEGF的表达，从而起到抗血管生成的作用。3.达肝素钠可抑制肿瘤细胞表面VEGF的表达，通过VEGF自分泌途径抑制肿瘤细胞增殖。