研究目的:观察P物质(substance P, SP)及孤啡肽(orphanin , OFQ)对健康大鼠离体心脏功能的影响,探讨感觉神经与交感神经在心脏功能调节中的相互作用。研究背景:已有的相关研究表明,SP、OFQ参与机体对心血管系统的调节。在发生急性心肌缺血时,交感-肾上腺素能活性明显增高,且心肌组织内上述活性物质的含量均有所增加,提示SP、OFQ参与并影响急性心肌缺血的病理变化过程,目前其在器官水平对心脏功能的调节作用及其作用机制还不明确。研究内容及方法:第一章:P物质对健康大鼠离体心脏功能的影响采用体重250-280g的健康雄性SD大鼠。25%乌拉坦腹腔注射麻醉下取大鼠心脏,建立Langendorff灌流离体心脏实验模型。实验研究分五部分:1.观察不同浓度NK-1受体拮抗剂[D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-Substance P(10-7 mol·L-1,10-8 mol·L-1,10-9mol·L-1)对健康大鼠离体心脏功能的影响;2.观察不同浓度SP(10-6 mol·L-1,10-7 mol·L-1,10-8 mol·L-1)对NE诱发的心脏功能改变的影响;3.观察使用不同浓度NK-1受体拮抗剂(10-7 mol·L-1,10-8 mol·L-1,10-9 mol·L-1)对SP+NE诱发的心脏功能改变的影响。4.观察使用NK-2受体拮抗剂(MEN10376)对SP+NE诱发的心脏功能改变的影响。5.观察不同浓度NK-1受体拮抗剂(10-7 mol·L-1,10-8 mol·L-1,10-9 mol·L-1)对NE诱发的心脏功能的影响;第二章:孤啡肽对健康大鼠离体心脏功能的影响建立Langendorff灌流离体心脏实验模型步骤同上,实验研究分两部分:1.观察不同浓度孤啡肽(OFQ)(10-6 mol·L-1,10-7 mol·L-1,10-8mol·L-1)对健康大鼠离体心脏功能的影响并观察使用10-6 mol·L-1浓度孤啡肽受体拮抗剂(UFP-101)对孤啡肽(10-6 mol·L-1)诱发的心脏功能改变的影响。2.观察不同浓度OFQ(10-6 mol·L-1,10-7 mol·L-1,10-8 mol·L-1)对NE诱发的心脏功能的影响并观察使用10-6 mol·L-1浓度孤啡肽受体拮抗剂(UFP-101)对OFQ+NE诱发的心脏功能改变的影响。本实验采用的主要观察指标有:左室收缩压(left ventricular systolic pressure ,LVSP),左室舒张末期压(left ventricular end-diastrolic pressure ,LVEDP),左室主动收缩压(left ventricular developed pressure ,LVDP=LVSP- LVEDP),心率(heart rate ,HR)。收缩时心肌最大变化速率(+dp/dtmax),舒张时心肌最大变化速率(-dp/dtmax)。结果(1) a.与对照组比较,D-SP (10-8M)组LVSP和LVDP均明显增高(P<0.01),其余指标差异无统计学意义(P>0.05);D-SP(10-7M),D-SP(10-9M)组心功能各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。b.与NE(10-5M)组比较,NE(10-5M)SP(10-6M),NE(10-5M)SP(10-7M),NE(10-5M)SP(10-8M)组的LVEDP增高(P<0.05),NE(10-5M)SP(10-6M)组+dp/dtmax与-dp/dtmax降低(P<0.05),LVSP,LVDP和HR差异均无统计学意义(P>0.05)。c.与NE(10-5M)SP组比较,NE(10-5M)SP(10-7M)D-SP(10-7M)组LVEDP和HR均明显降低( P<0.05 ), LVSP和LVDP差异均无统计学意义( P>0.05 );NE(10-5M)SP(10-7M)D-SP(10-8M),NE(10-5M)SP(10-7M)D-SP(10-9M)组心功能各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。NE(10-5M)SP(10-8M)D-SP(10-7M)组LVEDP明显降低(P<0.01),+dp/dtmax与-dp/dtmax明显升高(P<0.01), LVSP,LVDP和HR差异均无统计学意义(P>0.05); NE(10-5M)SP(10-8M)MEN10375(10-7M)组心功能各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。d.与NE(10-5M)组比较,NE(10-5M)D-SP(10-7M)组LVSP,LVDP和+dp/dtmax均明显增高(P<0.01),NE(10-5M)D-SP(10-9M)组+dp/dtmax明显降低(P<0.01)其余指标差异均无统计学意义(P>0.05);NE(10-5M)D-SP(10-8M)组心功能各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。(2) a.与对照组比较,OFQ(10-6M), OFQ(10-8M)组LVSP和LVDP均明显增高(P<0.01);OFQ(10-7M), OFQ(10-8M)组LVEDP降低(P<0.05), -dp/dtmax增高(P<0.05);OFQ(10-6M), OFQ(10-7M)组+dp/dtmax增高(P<0.05),心率下降较明显(P<0.05)。b.与OFQ(10-6M)组比较,OFQ(10-6M)UFP(10-6M)组的LVSP,LVDP,+dp/dtmax和-dp/dtmax均明显降低(P<0.05)而LVEDP和HR差异无统计学意义。c.与NE(10-5M)组比较,NE(10-5M)OFQ(10-6M)组LVEDP明显降低(P<0.05)其余各项指标均明显增高(P<0.05);NE(10-5M)OFQ(10-8M)组LVSP与LVDP明显增高(P<0.05),其余指标差异均无统计学意义(P>0.05)。d.与NE(10-5M)OFQ(10-6M)组比较,NE(10-5M)OFQ(10-6M)UFP(10-6M)组LVEDP明显增高(P<0.01)其余各项指标均明显降低(P<0.01)。结论(1)机体内源性SP可能参与心脏收缩和舒张功能的调节; NK-1受体参与介导SP对心功能的调节。SP可能通过对肾上腺素能机制的调制实现对心脏功能的调节。(2)孤啡肽对健康大鼠离体心脏具有正性变力作用,负性变时作用,其拮抗剂UFP-101能拮抗其正性变力作用;孤啡肽可以增加NE的正性变力变时作用此作用可被其拮抗剂UFP-101拮抗。