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目的利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS6从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,并对相关的标志物在肺癌形成中的作用进行初步研究,为肺癌的临床早期诊断和治疗奠定基础。方法通过化学方法合成多肽ZS6并部分标记绿色荧光素异硫氰酸(FITC)。利用细胞免疫荧光、组织免疫荧光鉴定多肽ZS6-FITC与人肺癌细胞、人肝癌细胞、人结肠癌细胞、人肺癌组织结合的亲和力和特异性。然后,通过多肽ZS6-FITC在荷瘤裸鼠体内的分布实验观察ZS6在荷人肺癌A549裸鼠体内的分布情况,使用液相色谱法测定多肽ZS6的体外稳定性及其在大鼠体内代谢分布情况。为了进一步研究多肽ZS6与肺癌的结合位点,我们以生物素标记的十二肽ZS6为探针,通过化学方法合成生物素(Biotin)偶联的多肽ZS6,将ZS6 Biotin固定在亲和素(avidin)包被的酶标板板上,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过四轮减性筛选后,挑取与ZS6特异性结合的噬菌体单克隆、扩增、纯化,再通过PCR技术扩增、产物纯化后,进行DNA测序,测序结果经过生物信息学分析。结果筛选出18个与ZS6特异性结合的T7噬菌体克隆,所得结果在美国国立生物技术信息中心Blast数据库(www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)进行比对得出5种蛋白,其中出现频率最高的是GSTA1,所占比例为44.4%。其余的均已确定为肿瘤相关基因。结论从人类肺癌cDNA噬菌体展示文库中筛选得到潜在的肺癌肿瘤标志物,出现频率最高的基因GSTA1 mRNA在肺癌细胞表达水平高于肺正常细胞,可能是肺癌发生发展的重要相关基因之一。为进一步研究肺癌的诊治奠定基础。