利用肺癌特异性结合多肽ZS6筛选肺癌相关肿瘤标志物

来源 :广东药学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mypika
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS6从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,并对相关的标志物在肺癌形成中的作用进行初步研究,为肺癌的临床早期诊断和治疗奠定基础。方法通过化学方法合成多肽ZS6并部分标记绿色荧光素异硫氰酸(FITC)。利用细胞免疫荧光、组织免疫荧光鉴定多肽ZS6-FITC与人肺癌细胞、人肝癌细胞、人结肠癌细胞、人肺癌组织结合的亲和力和特异性。然后,通过多肽ZS6-FITC在荷瘤裸鼠体内的分布实验观察ZS6在荷人肺癌A549裸鼠体内的分布情况,使用液相色谱法测定多肽ZS6的体外稳定性及其在大鼠体内代谢分布情况。为了进一步研究多肽ZS6与肺癌的结合位点,我们以生物素标记的十二肽ZS6为探针,通过化学方法合成生物素(Biotin)偶联的多肽ZS6,将ZS6 Biotin固定在亲和素(avidin)包被的酶标板板上,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过四轮减性筛选后,挑取与ZS6特异性结合的噬菌体单克隆、扩增、纯化,再通过PCR技术扩增、产物纯化后,进行DNA测序,测序结果经过生物信息学分析。结果筛选出18个与ZS6特异性结合的T7噬菌体克隆,所得结果在美国国立生物技术信息中心Blast数据库(www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)进行比对得出5种蛋白,其中出现频率最高的是GSTA1,所占比例为44.4%。其余的均已确定为肿瘤相关基因。结论从人类肺癌cDNA噬菌体展示文库中筛选得到潜在的肺癌肿瘤标志物,出现频率最高的基因GSTA1 mRNA在肺癌细胞表达水平高于肺正常细胞,可能是肺癌发生发展的重要相关基因之一。为进一步研究肺癌的诊治奠定基础。
其他文献
目的:初步分析潮汕人群、客家人群、广府人群食管癌患者的临床病理特点,为广东省常住居民食管癌的预防和治疗提供线索。方法:对我院2009年6月1日至2010年12月31日收治的110例所
随着社会经济的发展,各项科技也逐渐成熟,互联网的应用以及普及使得现在进入了信息化时代。信息技术被广泛应用到各种不同的领域,体育管理过程中也逐渐应用了信息技术,信息技
<正>查士标(1615-1697)字二瞻,号梅壑,安徽休宁人。他是清初新安画派的重要代表人物,"与同里孙逸、汪之瑞、释弘仁称四大家"[1],当日扬州亦有"家家画轴查二瞻"[2]之说,可见其影
一、中国所得税制度的起源中国所得税制度的创建受欧美国家和日本建立所得税制度的影响,始议于20世纪之初。清末宣统年间(大约为1910年),曾经起草过《所得税章程》,其中既包括对企
高中语文课堂应该是有趣味、充满活力的,现实的课堂却常常是呆板沉闷、少生气、少情味。采用兴趣激发、设疑铺垫、学教融合、美境融情等方法构建高中语文快乐课堂,使教师进一
目的:EBV (Epstein-barr virus)感染在淋巴系统肿瘤中较常见,与淋巴系统肿瘤的发生、发展和预后均有关。EBV的BCRF1编码框产物和人类IL-10的氨基酸序列有84%的同源性,具有与I
目前原发性血小板增多症尚无根治方法,孙雪梅教授在中西医结合治疗该病方面具有丰富的临床经验,笔者从指导思想和治疗要点等方面对其经验进行整理、总结,认为坚持中西医结合
家电行业的渠道变革从来就没有停止过,如今,当始于上游策略调整而引爆的家电行业分销渠道洗牌运动在全国各地粉墨登场之后,家电行业正在从“终端为王”向“县代为王”转变。
期刊
以北京市怀柔区国有林场为案例,在国有林场生态公益型的功能定位和一类事业单位管理体系的新要求下,分析林场发展现状和存在问题,并对下一步生态建设、基础设施建设、功能提