泛素化修饰是细胞内重要的翻译后修饰,与蛋白质降解、细胞周期、内吞、以及压力应激等有着重要的关系。低毒病毒CHV1-EP713的侵染会导致泛素分泌到胞外。板栗疫病菌基因组共有三个编码泛素的基因,其中两个为泛素核糖体融合基因,另一个为编码三个头尾相连泛素的聚泛素基因。定量PCR分析发现,低毒病毒的侵染造成了板栗疫病菌聚泛素基因cpubi4转录水平上调,推测cpubi4基因的上调与低毒病毒侵染造成的压力有关。通过同源双交换,得到基因敲除突变体△cpubi4。突变体菌落生长缓慢并有菌丝畸形现象,气生菌丝几乎消失,温度压力耐受能力降低,孢子产量减少,致病力缺失,但是并不影响低毒病毒的胞内累计量。△cpubi4的蛋白质泛素化水平相比出发菌株DK80有着明显的降低。同时,在相同重量菌丝的情况下,△cpubi4的蛋白质浓度相比出发菌株DK80有着显著的升高。推测聚泛素基因的缺失导致胞内泛素的减少,造成胞内多数蛋白质的泛素化程度下降,进而使蛋白质累积及其他与泛素化相关的调控混乱,在表型、产孢、致病力等表征发生变化。为了了解板栗疫病菌的泛素化蛋白质总谱,采用了 K-ε-GG特异性抗体富集泛素化肽段,所得肽段使用毛细管高效液相色谱分离后进行高分辨率质谱鉴定。以EP155为样品,总共得到2663个泛素化肽段,归属于1181个蛋白质,其中有55%的蛋白质只包含一个泛素化位点。通过对泛素化肽段进行基序分析,得到了9种不同的基序。通过注释分析,发现了多个与致病力直接相关的蛋白质包含泛素化位点。为进一步明确板栗疫病菌聚泛素基因cpubi4的缺失如何影响蛋白质的泛素化,选择了△cpubi 和DK80进行泛素化蛋白质组比较分析。共有45个蛋白质中的51个泛素化肽段发生表达量的上调,236个蛋白质中的378个泛素化肽段出现表达量的下调。主要涉及蛋白质合成代谢,信号传导,次级代谢物代谢等通路途径。说明,cpubi4基因的缺失直接改变胞内一系列蛋白质的泛素化程度。本研究为阐明聚泛素基因与丝状真菌的生长,致病力,泛素化的关系提供了实验证据,为研究蛋白质泛素化在真菌中的作用提供了一定的研究基础。