半夏泻心汤含药血清对人胃癌腹膜转移细胞凋亡及侵袭的影响

来源 :甘肃中医药大学(原名:甘肃中医学院) | 被引量 : 6次 | 上传用户:cannyjie
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目的:通过半夏泻心汤含药血清干预人胃癌腹膜转移细胞GC9811-P,研究被干预后细胞的凋亡,侵袭及TGF-β1、VEGFm RNA和蛋白的表达水平。探讨半夏泻心汤干预胃癌腹膜转移的机制,为中医药治疗肿瘤提供实验依据。方法:4只家兔分别灌服半夏泻心汤和生理盐水,无菌条件下心脏采血,将含药血清配制成25μL/m L、50μL/m L、100μL/m L的浓度干预GC9811-P细胞,用RTCA检测血清干预后细胞的生长及迁移,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,激光共聚焦显微镜下观察经罗丹明123染色后的各组细胞数目及线粒体膜电位变化,RT-PCR检测TGF-β1、VEGFm RNA的表达,Western blot检测TGF-β1、VEGF蛋白的表达水平。结果:根据实验结果显示,与空白血清组相比,GC9811-P细胞经过不同浓度的半夏泻心汤含药血清(25、50、100μL/m L)处理后,细胞增殖受到明显抑制。RTCA实时动态检测表明,对照组(SF组),即下室中没加血清的,GC9811-P细胞基本没有发生迁移,其它经过不同浓度半夏泻心汤含药血清(0、3.1、6.2、12.5、25、50、100μL/m L)干预的各组GC9811-P细胞均发生了迁移,至23h时,迁移能力无明显差异(P>0.05),23h后,25、50、100μL/m L的半夏泻心汤含药血清能显著抑制其迁移能力。而通过细胞流式图可以看出与空白血清组相比,半夏泻心汤含药血清低剂量组(25 L/m L)、中剂量组(50μL/m L)、高剂量组(100μL/m L)的细胞位于G2/M、S期的百分比降低,随着药物浓度的增大,效应越明显。激光共聚焦显微镜图片看出与空白血清组相比,各个剂量组细胞内荧光强度减弱,线粒体膜电位降低,且药物血清浓度越高,强度越弱,膜电位越低。RT-PCR及Western blot结果显示,半夏泻心汤含药血清可以下调VEGF的m RNA的表达,随着半夏泻心汤含药血清浓度的升高,TGF-β1和VEGF的蛋白表达均下降。结论:半夏泻心汤含药血清可以抑制人胃癌腹膜转移细胞GC9811-P的凋亡和侵袭,并呈明显的效应-剂量关系,其机制可能与抑制TGF-β1和VEGF的分泌有关。
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