本文以裙带菜配子体为材料,从转化方法、筛选标记的选择、功能基因稳定转化和内源启动子克隆四个方面对裙带菜的基因工程进行了深入研究。建立了稳定的遗传转化体系,进一步充实了大型海藻转基因的研究,为裙带菜的育种工作提供了新的手段,使得利用裙带菜生产外源活性物质成为可能。本文具体的研究结果为:1.利用基因枪法将荧光标记基因(EGFP)载体导入裙带菜配子体中,通过共聚焦荧光显微镜观察,找到了表达绿色荧光蛋白的配子体,实现了EGFP基因在裙带菜配子体中的瞬间表达,确定了基因枪法的转化条件,验证了所用表达质粒载体在裙带菜配子体转基因研究中的有效性。2.利用基因枪法将鲎素多肽基因(tac)和草丁膦抗性基因(bar)导入配子体,通过草丁膦筛选和配子体恢复生长,挑选到抗性克隆,PCR检测显示有60%的抗性克隆含有bar基因,由此证明bar基因是裙带菜配子体基因工程有效的筛选标记。此外,利用PCR方法从转化组中扩增出tac基因,成功构建了转化鲎素多肽(tac)基因的配子体。3.在鲎素多肽基因成功转化的基础上,利用基因枪法将溶栓药物瑞替普酶基因(rt-pa)和草丁膦抗性基因(bar)导入裙带菜配子体中,筛选后获得抗性克隆配子体。通过PCR检测和基因组DNA-southern杂交实验,证明rt-pa基因已整合进配子体基因组DNA,实现了外源药物蛋白基因在裙带菜配子体基因组中的稳定整合。4.根据lhcf基因在藻类基因组中的保守性设计引物,扩增了裙带菜配子体的lhcf基因部分序列。在此基础上,以基因组步移法得到了其上游调控序列,并利用生物信息学分析了其上游的调控区和启动子区,为裙带菜配子体基因工程选择内源启动子、高效启动外源基因表达的研究做了铺垫。