研究背景：亚临床甲状腺减退症(简称亚临床甲减)(Subclinical hypothyroidism, SH)是一种常见内分泌疾病,其特征为血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine FT3)、血清游离甲状腺素(free thyroxine FT4)水平正常,而血清促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平升高。根据血清TSH水平,亚临床甲减可分为轻度亚临床甲减(4.2mIU/L＜TSH≤10 mIU/L)和重度亚临床甲减(TSH＞10mIU/L)。研究表明亚临床甲减是除LDL-C等其它因素的动脉粥样硬化和心肌梗死的独立危险因素。而且亚临床甲减患者冠心病发病率和死亡率随着的TSH的升高而增高；动脉粥样硬化的病情与血清TSH水平显著相关。鉴于亚临床甲减与动脉粥样硬化等多种重大疾病的发生关系密切,多数学者认为虽然亚临床甲减患者没有明显的临床症状,但应当用甲状腺素等药物进行替代治疗,从而减少由亚临床甲减导致的动脉粥样硬化和冠心病等严重疾病发生的危险。然而,目前对于何时、如何给与亚临床甲减患者替代治疗还存在争议,多数学者认为对于血清TSH＞10 mIU/L的亚临床甲减患者需要进行替代治疗,患者能够从中获益；但是对于血清TSH在≤10 mIU/L亚临床甲减患者是否需要替代治疗,能否降低动脉粥样硬化和缺血性心脏病的发病危险目前尚无统一结论。甲状腺素替代治疗对亚临床甲减患者血脂特征的影响已有很多研究,但仍存在争论,有研究表明亚临床甲减患者血清中磷脂降解的关键酶PLA2-ⅡA显著升高,而TSH能促进磷脂降解而产生大量包括花生四烯酸在内的脂肪酸。花生四烯酸是类花生酸的前体,是哺乳动物体内一种必需多不饱和脂肪酸,Ca2+调节胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)催化的磷脂水解是其重要来源。花生四烯酸能在酶的催化下通过不同代谢通路生成多种具有不同生物活性的类花生酸(eicosanoids).类花生酸作为关键信号分子,在炎症、血小板功能、出凝血、过敏反应和氧化应激中发挥重要调节作。特别是一些类花生酸在动脉粥样硬化这一慢性炎症性疾病的发生发展中起着关键作用,是动脉粥样硬化的新型生物标志物。因此有必要揭示亚临床甲减患者类花生酸代谢异常以及左旋甲状腺素替代治疗对其影响,这对理解亚临床甲减与心血管疾病的关系、确定替代治疗的时机和评价替代治疗的意义等都有重要意义。然而,迄今为止对上述问题的研究仍未见报道。研究目的：1、观察短期左旋甲状腺素替代治疗对轻、重度亚临床患者血脂水平和甲状腺功能的影响；2、比较左旋甲状腺素替代治疗前后轻、重度亚临床甲减患者与正常对照组血清cPLA2表达水平变化；观察TSH对细胞内外cPLA2表达水平、活性的影响；探讨TSH对于类花生四烯酸代谢通路关键酶cPLA2的影响；3、对比左旋甲状腺素替代治疗前后轻、重度亚临床甲减患者血清中不同代谢通路主要类花生四烯酸的变化,探讨替代治疗替代治疗的时机和评价替代治疗对于类花生四烯酸代谢的影响。4、分析类花生四烯酸水平与包括TSH在内的多种因素之间的相互联系,了解亚临床甲减患者动脉粥样硬化发病风险增加的潜在机制。研究对象：研究对象来自山东省宁阳县2013年1月至2月流调人群,严格按照既定的入选标准和排除标准,二次检测结果均符合亚临床甲减的诊断并最终诊断为亚临床甲减。挑选30例轻度亚临床甲减(TSH 4.2-10.0mIU/L)；20例重度亚临床甲减患者(TSH＞10mIU/L)；以及22例年龄、体重指数相匹配的正常人。其中轻度亚临床甲减患者给予左旋甲状腺素片每天25 mcg口服,重度亚临床患者患者均予左旋甲状腺素片每天50 mcg口服。治疗3个月。研究方法：1、观察左旋甲状腺素替代治疗对亚临床甲减患者甲状腺功能及血脂影响：收集研究对象临床资料,记录纳入对象人口学特征；测定治疗前后亚临床甲减患者血标本进行常规生化指标及甲状腺功能、血脂检测；2、探讨TSH对cPLA2影响：采用免疫吸附测定法测定治疗前后轻、重度亚临床患者血清cPLA2水平并进行对比。在体外用不同浓度bTSH处理正常人外周血单个核细胞(PBMC),检测细胞内外cPLA2活性、表达水平变化与TSH之间的关系；3、探讨左旋甲状腺素替代治疗对亚临床甲减患者不同代谢通路主要类花生四烯酸的影响：应用Thermo Vantage三重四极杆液质联用仪(LC-ESI-MS)进行血清靶目标组学,分析替代治疗前后亚临床甲减患者血清不同通路的类花生四烯酸变化；采用酶联免疫法测定替代治疗前后氧化应激标志物血清8异前列腺素(8-isoPG2a)水平。统计分析：本实验计量资料均以χ±s表示,连续变量资料符合正态分布者组间采用ANOVA分析,非正态分布者采用Kruskal-Wallis检验。采用Pearson’s相关分析和多元回归分析进行因素间的相关分析。显著性阈值为p<0.05。以上分析用SPSS Statistics 18.0执行(SPSS Inc.,Chicago, IL, USA)。结果：1、与正常对照相比,轻度亚临床甲减组和重度亚临床甲减组患者TC和TG升高,但差异无显著性。甲状腺相关激素中,各组FT3和FT4均无明显差异；但与正常对照相比,轻度亚临床甲减组和重度亚临床甲减组患者血清TSH水平都显著升高,且重度亚临床甲减组显著高于轻度亚临床甲减组。左旋甲状腺素替代治疗3个月后,轻度亚临床甲减组和重度亚临床甲减组患者血清TSH和TC水平均显著下降,TG、LDL、HDL无明显变化。另外,Person相关分析结果表明亚临床甲减患者TSH水平与TC呈显著正相关。这一结果提示TSH升高可导致亚临床甲减患者的TC异常。2、与正常对照组相比,轻度和重度亚临床甲减组cPLA2表达水平显著升高,重度亚临床甲减组更加明显。左旋甲状腺素替代治疗3个月后重度亚临床甲减患者血清cPLA2表达水平显著下降,但是重度亚临床甲减患者中cPLA2仍高于正常对照组。相关分析结果表明亚临床甲减患者cPLA2表达水平与TSH呈正相关。多元回归分析结果也表明TSH与cPLA2相关性最强。在体外(外周单核细胞)对TSH与cPLA2之间的关系进行了分析。结果表明随TSH浓度增加,细胞内cPLA2的表达水平及活性显著提高。同时对培养基和细胞内的cPLA2关系进行了分析。结果表明培养基中cPLA2的表达水平与细胞内cPLA2的活性显著呈正相关,这意味着cPLA2的血清表达水平可能也反映出其在细胞内的活性水平。3、血清学靶目标组学分析提示不同亚临床甲减患者替代治疗前后多种类花生四烯酸的变化。结果表明与正常对照相比,轻重度亚临床甲减患者中主要类花生四烯酸水平(12-HETE,11-dehydroTXB2,和8-isoPGF2a)都显著升高,11-dehydro TXB2/6-Keto PGF1a的比值也明显升高。这些结果提示亚临床甲减患者类花生四烯酸相关通路显著异常,导致炎症反应、血栓形成、氧化应激等反应明显增强。经左旋甲状腺素替代治疗3个月后轻重度亚临床甲减患者血清类花生酸中8-isoPGF2a、11-dehydroTXB2 以及 11-dehydro TXB2/6-Keto PGF1a的比值都显著下降。4、为了揭示与亚临床甲减患者多种类花生酸异常有关的可能因素,对类花生四烯酸水平与甲状腺激素水平、血脂水平进行相关分析。结果提示8-isoPGF2a与TSH、cPLA2、TC、TG和LDL-C呈正相关；6-Keto PGF1a与TSH、TC显著负相关；5-HETE与TC、LDL-C正相关,但相关性较弱；此外,TSH还与11-dehydro-TXB2、11-dehydro-TXB2/6-Keto PGF1a呈正相关。上述结果提示影响亚临床甲减患者类花生酸的因素复杂,机制都需要进行研究。结论：1、短期左旋甲状腺素替代治疗能改善亚临床甲减患者血TC代谢异常和甲状腺功能异常。2、亚临床甲减患者血清cPLA2表达水平显著升高,左旋甲状腺素替代治疗能纠正这一异常。3、亚临床甲减患者血清主要类花生四烯酸显著升高,短期左旋甲状腺素替代治疗可改善亚临床甲减患者类花生四烯酸部分代谢通路异常。短期替代治疗后亚临床甲减患者在缓解炎症反应、氧化应激、血栓形成等方面有一定获益。推测短期替代治疗对降低亚临床甲减患者动脉粥样硬化发病危险有积极作用。