水稻离子通道蛋白OsVDAC5及其互作蛋白的功能分析

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电压依赖性阴离子通道(Voltage-dependent anion channels,VDAC)是线粒体和细胞溶质沟通的重要桥梁,在物质运输、能量交换和细胞凋亡方面发挥着重要的调控作用。本实验室前期以水稻OsVDAC5为诱饵通过酵母双杂交筛选出七个互作蛋白,命名为OsV5IP1-OsV5IP7,并完成了定位和互作验证工作。本研究以前期获得的OsVDAC5 RNAi植株、OsV5IP5和OsV5IP7的T-DNA插入突变体、OsVDAC5及OsV5IPs超表达植株为研究材料,通过对其基因型和表达量的鉴定分析,结合农艺性状考察和逆境表型鉴定初步探讨OsVDAC5及两个互作蛋白OsV5IP5和OsV5IP7的功能。具体结果如下:1.完成了OsV5IP5和OsV5IP7突变植株,OsVDAC5干涉植株、OsVDAC5及其互作蛋白转基因超表达植株的分子鉴定和表型考察,发现OsVDAC5干涉植株结实率相比野生型显著下降;OsV5IP5和OsV5IP7纯合突变体相比野生型也表现较低的花粉育性和结实率。表明OsVDAC5及两个互作蛋白OsVIP5和OsVIP7共同参与水稻花粉发育的调控。另外,获得了表达量显著上升的OsVDAC5,OsV5IP5和OsV5IP7超表达植株分别为4,5,2株。2.逆境和激素表达谱结果显示OsVDAC5、OsV5IP5和OsV5IP7受到多种逆境和激素的响应应答。OsVDAC5的表达水平在干旱胁迫和ABA处理早期显著上升,在盐、冷胁迫和水杨酸处理后持续上升,但不受茉莉酸诱导。OsV5IP5受干旱,盐和冷处理下调表达,但受茉莉酸,水杨酸和ABA上调表达。OsV5IP7受干旱胁迫表达下调,但受盐,冷和水杨酸处理表达显著上升,不受茉莉酸诱导。盐胁迫实验结果显示OsVDAC5干涉植株、OsV5IP5和OsV5IP7纯合突变体植株相比野生型对盐胁迫表现出较强的敏感性,表明OsVDAC5及其互作蛋白可能共同介导水稻的耐盐性。综上所述,OsVDAC5及其互作蛋白可能在水稻花粉发育和耐盐性上发挥重要的功能。
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