PLGA静电纺丝膜预防大鼠术后粘连的初步研究

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目的:利用小鼠成纤维细胞和腹腔粘连大鼠模型,研究不同厚度的PLGA静电纺丝膜在预防腹腔粘连中的作用。方法:(1)将小鼠成纤维细胞NIH3T3接种到Ctrl+膜、160μm膜和60μm膜上,培养24h和48h,分别用CCK-8试剂盒、罗丹明-鬼笔环肽染色法和Live-Dead试剂盒检测细胞在膜上的增殖情况、形态以及存活死亡情况,以确定PLGA静电纺丝膜与细胞的兼容性。(2)将SD大鼠随机分成四组,用四种不同的手术方法处理。2周后将大鼠处死,解剖鉴定粘连情况,并测定腹腔灌洗液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,血清中碱性磷酸酶(AKP)活性,血常规,并称量脏器重量。以评价构建的大鼠腹腔粘连动物模型。(3)将SD大鼠随机分成五组,其中两组是正常对照组和阴性对照组。用筛选出来的粘连动物模型制作方法进行手术处理,并将膜放置于可能产生粘连的部位。10天后将SD大鼠处死,分析观察不同厚度的PLGA静电纺丝膜在阻止大鼠腹腔粘连形成中的预防效果。结果:(1)小鼠成纤维细胞NIH3T3在Ctrl+膜、160μm膜和60μm膜上培养24h时后细胞活力分别为32%、12%和6%,48h时后活力分别为15%、11%和3%。细胞在PLGA静电纺丝膜上形态不规则且没有铺展开的细胞,大多数进入膜孔隙中;Ctrl+膜上的细胞都已经铺展开。PLGA静电纺丝膜上细胞死亡率非常低,Ctrl+膜上细胞死亡率极高,几乎没有存活的细胞。(2)四种方法建立的腹腔粘连动物模型的重度粘连发生率分别为66%、28%、50%和33%,相应的死亡率分别为40%、30%、60%和40%。腹腔灌洗液中的LDH和血清中的AKP活性、血常规、脏器重量都没有显著差异。(3)Ctrl-组、Ctrl+组、160μm组和60μm组粘连发生率分别为80%、14%、25%和71%,并发症发生率分别为83%、62.5%,12.5%和14%。结论:PLGA静电纺丝膜具有较好的细胞相容性,能够显著减少和减轻术后大鼠腹腔粘连和并发症的发生,大大改善了大鼠术后的生存质量。不同厚度PLGA静电纺丝膜对术后粘连的影响较大,较厚(160μm)的PLGA静电纺丝膜能显著减少术后粘连的发生率。
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