提前光照刺激对早产近视小鼠视网膜caspase-3表达的影响

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目的:通过人工开睑使新生小鼠接受提前光照,建立早产近视小鼠模型,观察早产近视小鼠视网膜的凋亡情况以及caspase-3的表达变化,探讨早产近视的发病机理。方法:随机选取实验用C57BL/6J新生小鼠共60只,分成3组:A组(P6开睑组)、B组(P10开睑组)和C组(自然开睑组),每组各20只。所有小鼠均置于室内在光照与黑暗周期为12h:12h的环境中分笼饲养。于P6(6日龄,下同)和P10分别对A组和B组小鼠右眼进行人工开睑,使该眼提前接受光照,左眼为自身对照组,不作处理;C组小鼠双眼待自然开睑。所有小鼠于P15检影验光获得双眼屈光度数,采用电子数显千分尺测量眼轴长度,TUNEL法检测各组小鼠视网膜细胞的凋亡,免疫组化方法和Western-Blot蛋白印迹法检测小鼠视网膜中caspase-3的表达情况。结果:1.A组小鼠右眼平均屈光度(31.40±0.25)D与左眼(38.95±0.36)D相比较,形成了(-7.55±0.15)D的相对近视,具有显著性差异(P<0.05);B组小鼠右眼平均屈光度(33.86±0.27)D与左眼(39.11±0.32)D相比较,形成了(-5.25±0.10)D的相对近视,差异具有显著性(P<0.05);C组小鼠双眼平均屈光度比较无明显差异。2.A组及B组小鼠右眼平均眼轴均明显短于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.免疫组化检测caspase-3在A组和B组小鼠视网膜中均有阳性表达,主要表达于胞浆,阳性细胞主要位于内核层和神经节细胞层。免疫组化结果显示A组和B组小鼠右眼caspase-3蛋白水平升高,与C组比较具有统计学差异(P<0.05)。4.TUNEL检测结果显示A组和B组小鼠右眼视网膜神经节细胞层均可见棕黄色凋亡细胞。5.Western-Bolt结果显示caspase-3蛋白在A组和B组小鼠视网膜中的表达量上调,与C组具有统计学差异(P<0.05)。结论:1.通过提前开启小鼠眼睑使其接受光照刺激的方法,成功建立早产近视小鼠模型,并且接受光照的时间越早,小鼠形成的相对近视度数越高。2.提前光照刺激小鼠近视形成过程中,视网膜caspase-3蛋白表达上调,神经节细胞和内核层细胞发生凋亡,caspase-3的高表达可能是促进早产近视小鼠视网膜细胞凋亡的原因之一。
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