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研究目的:本研究的目的是合成和表征载Ag+和Ca2+的PLGA亚微粒,并研究该材料通过超声作用渗透到牙本质小管的效果,对浮游的粪肠球菌和牙龈卟啉单胞菌及其生物膜的抗菌作用和材料在体外的矿化特性。材料和方法:通过水/油/水(W/O/W)乳化挥发蒸发法合成AgCa-PLGA亚微粒。通过动态光散射(DLS)测量材料的尺寸分布范围,水合粒径,多分散指数(PDI)以及Zeta电位。通过场发射扫描电子显微镜(FE-SEM)和能量衍射光谱仪(EDS)观察材料的形貌及检测元素组成。AgCa-PLGA和Ca-PLGA亚微粒的包封率(EE)以及离子释放特性通过电感耦合等离子体光学发射光谱法(ICP-OES)测量。每隔三天,测量材料的pH值。采用CFUs计数法研究释放24小时及7天的材料对浮游形式的粪肠球菌以及牙龈卟啉单胞菌的抗菌作用。采用CCK-8法评估材料对MC3T3-E1的细胞毒性。通过FE-SEM观察材料在牙本质片上的渗透性和材料对附着在牙本质片上的粪肠球菌和牙龈卟啉单胞菌的抗菌效果。同时,使用紫外分光光度仪监测不同的牙本质片直接浸入新鲜液体培养基后的OD值,粪肠球菌监测8个小时,牙龈卟啉单胞菌监测48个小时。评估AgCa-PLGA亚微粒的矿化能力,将30mg材料压制成片状,并在37℃的模拟体液(SBF)中浸泡3周。ICP用于量化Ca含量。采用FE-SEM和EDS监测每组材料片表面矿化晶体的形成情况。结果:FE-SEM图像显示AgCa-PLGA亚微粒呈均一的球形。AgCa-PLGA的水合粒径和PDI分别为239.30±13.79nm和0.347±0.03。所有材料的Zeta电位呈负性。EDS结果显示AgCa-PLGA中存在C,O,Ag和Ca元素。AgCa-PIGA可在30天内持续释放Ag+和Ca2+,pH值在前18天迅速下降并最终保持在4.7左右。在浮游形式的粪肠球菌和牙龈卟啉单胞菌的抗菌试验中,PLGA和Ca-PLGA无抗菌活性(P>0.05),5mg/mL和10mg/mL的AgCa-PLGA均显示出较强的抗菌作用(p<0.05)。在材料释放24小时和7天的抗菌试验,材料对粪肠球菌的抗菌效率最高达到43.73%和57.51%,材料对牙龈卟啉单胞菌的抗菌效率最高达到99.89%和99.58%。牙本质片置于AgCa-PLGA悬浊液中经超声处理后,在牙本质小管开口处和纵剖面观察到许多AgCa-PLGA亚微粒。通过监测粪肠球菌OD值发现,经AgCa-PLGA处理过的牙本质片在4至7小时内,细菌量显著减少(P<0.05),尤其是在第6个小时降低幅度最大(P<0.001)。通过监测牙龈卟啉单胞菌OD值实验结果表明,AgCa-PLGA组的OD值在48小时内没有增加(P<0.01)。FE-SEM图像也证实AgCa-PLGA的抗菌作用优于其他组,并证实AgCa-PLGA能在体外诱导羟基磷灰石样晶体形成。CCK-8实验结果表明该材料对MC3T3-E1没有细胞毒性作用。结论:从抗菌剂的发展前景考虑,我们成功合成了AgCa-PLGA亚微粒。AgCa-PLGA亚微粒可在30天内持续释放Ag+和Ca2+,并且对粪肠球菌和牙龈卟啉单胞菌均有较强的抗菌作用。AgCa-PLGA亚微粒可以通过超声激活渗透到牙本质小管内部并抑制粪肠球菌和牙龈卟啉单胞菌对牙本质的黏附和定植,对前成骨细胞没有细胞毒性作用,并可在材料表面诱导羟基磷灰石样晶体形成。因此,AgCa-PLGA亚微粒可以发展成为潜在有效的生物材料,应用在牙科和其他相关医学领域的感染控制和硬组织再生。