【摘 要】
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目的利用脱氧皮质酮乙酸酯（deoxycorticosterone acetate,DOCA）加盐诱导小鼠主动脉瘤模型,分析P-选择素糖蛋白配体-1（P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1）与主动脉瘤的关系,初步探究PSGL-1影响主动脉瘤发生的机制。方法1.小鼠主动脉瘤模型的复制及分组:选用10月龄的PSGL-1-/-小鼠和PSGL-1+/+小鼠（C57BL
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目的利用脱氧皮质酮乙酸酯（deoxycorticosterone acetate,DOCA）加盐诱导小鼠主动脉瘤模型,分析P-选择素糖蛋白配体-1（P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1）与主动脉瘤的关系,初步探究PSGL-1影响主动脉瘤发生的机制。方法1.小鼠主动脉瘤模型的复制及分组:选用10月龄的PSGL-1-/-小鼠和PSGL-1+/+小鼠（C57BL/6J背景）为研究对象,采用DOCA加盐（DOCA+SALT）的方法复制主动脉瘤模型。DOCA给药方式为背部皮下植入DOCA缓释药片（50 mg,21天释放）,以盐水喂养的方式加盐（含0.9%Na Cl和0.2%KCl的水）。实验分组:（1）WT小鼠+SALT（2）WT小鼠+SALT+DOCA（3）PSGL-1+/++SALT（4）PSGL-1+/++SALT+DOCA（5）PSGL-1-/-+SALT（6）PSGL-1-/-+SALT+DOCA。采用异氟烷麻醉后超声观察小鼠腹主动脉的扩张程度和动脉瘤的形成情况,处死动物后取材。2.HE染色、Masson三色染色、EVG染色以及a-SMA染色观察腹主动脉病理变化。3.RT-PCR、Western blot和免疫荧光染色检测动脉瘤小鼠的主动脉组织中PSGL-1的表达水平。4.RT-PCR法检测动脉瘤小鼠的主动脉组织中炎症因子的表达水平。5.流式细胞术检测外周血白细胞中PSGL-1的表达水平,外周血单个核细胞-内皮细胞粘附率测定粘附于内皮细胞的外周血单个核细胞数量,RT-PCR检测主动脉组织中粘附分子的表达水平。6.免疫荧光法及Western blot检测NF-κB信号通路在主动脉组织中的激活状态。7.给予NF-κB激活剂TNF-α后,RT-PCR检测PSGL-1敲除主动脉组织中粘附分子的表达水平。结果1.采用DOCA+SALT成功建立小鼠动脉瘤模型。2.主动脉瘤小鼠的主动脉组织中PSGL-1的表达水平升高。3.PSGL-1敲除减少动脉瘤组织弹性纤维断裂,胶原蛋白积聚和平滑肌细胞变性,减轻主动脉瘤的病变程度。4.PSGL-1敲除使主动脉组织中促炎因子（TNF-α,IL-6,IL-1β,CCL-2）表达水平降低,抗炎因子（IL-10,IL-13）表达水平增加。5.PSGL-1敲除抑制NF-κB信号通路的激活,降低外周血单个核细胞与内皮细胞的粘附能力和粘附因子的表达。结论 DOCA+SALT诱导的小鼠动脉瘤模型中,主动脉组织的PSGL-1表达水平升高,PSGL-1敲除通过抑制NF-κB信号通路的激活,减少白细胞与内皮细胞的粘附,降低主动脉组织中炎症因子的表达,减轻动脉瘤的病变程度。
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