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目的RhoC(Ras homology C)是小分子量G蛋白超家族中Rho亚族的成员之一，是一种在活性的GTP形式和非活性的GDP形式之间循环的GTP酶，参与细胞的信号传导，肌动蛋白细胞骨架的调节等。近年的研究显示RhoC在许多癌组织中过表达，而且与肿瘤的侵袭转移密切相关。RhoGDIα被认为是RhoC的负性调节因子，它与GDP形、式的RhoC结合后，使其滞留于胞浆中，阻止其与膜上的GTP结合，从而抑制了RhoC的活性，在对一些肿瘤的研究中发现RhoGDIα表达或升高或降低。在肺癌中RhoC与RhoGDIα究竟是如何表达的，它们与临床病理因素及预后间的关系怎样尚不清楚。为了探讨RhoC和RhoGDIα在肺鳞癌、腺癌发生发展中的作用，我们研究了二者在肺鳞癌、腺癌中的表达情况，分析它们与临床病理因素及预后之间的关系。材料与方法1、免疫组织化学S-P法检测100例原发性肺鳞癌、腺癌及癌旁正常肺组织，均来自中国医科大学第一附属医院2001-2006年外科手术切除的标本，其中52例标本有完整的术后随访记录。所有患者术前均未接受过任何放疗或化疗。标本经中性福尔马林固定，石蜡包埋，制成4μm切片，经脱蜡、脱苯、水化后采用链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组化(S-P)法检测RhoC蛋白(1：50)和RhoGDIα蛋白(1：50)表达，以PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定：RhoC和RhoGDIα均以肿瘤细胞胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性表达，以染色强度和阳性细胞数比例评定阳性表达。光镜下每张切片选取癌细胞较多的5个高倍视野，每个视野计数100个细胞。着色强度分级为：无色(—)为0分、浅黄色(+)为1分、黄色及更深颜色(++)为2分。阳性细胞数分级为：≤50％为0分、51％-75％为1分、＞75％为2分。两项得分相乘结果≥2分为阳性病例。2、Western Blot采用60例新鲜原发性肺鳞癌、腺癌及相应的距癌灶旁5cm以上正常肺组织，均来自中国医科大学第一附属医院2004-2006年行外科手术切除的标本提取蛋白，考马斯亮蓝法进行蛋白定量。取等量蛋白，进行SDS-PAGE电泳和转印，一抗(RhoC1：100、RhoGDIα1：200、β-actinl：500)和辣根过氧化物酶标记二抗(1：1500)孵育，DAB显色。以β-actin为内对照，结果判定：PVDF膜上出现灰色条带，并对条带进行灰度值测定。3、应用SPSS11.0统计软件分析数据，P＜0.05为有统计学意义。结果1、RhoC和RhoGDIα在肺鳞癌、腺癌和癌旁正常肺组织中的表达RhoC和RhoGDIα的阳性信号均定位于细胞浆，前者的阳性率为68％(68／100)，后者的阳性率为73％(73／100)，二者在癌旁组织中的支气管上皮和肺泡上皮中为阴性表达(图1)。Western Blot结果显示：RhoC和RhoGDIα在肺鳞癌、腺癌和相应癌旁组织中均有表达，分子量分别为23KDa、30KDa，在肺癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(p=0.002，p=0.008)。2、RhoC和RhoGDIα的蛋白表达的相关性用Western Blot检测的肺癌组织的灰度值做Person相关分析，发现RhoC和RhoGDIα的蛋白表达无明显相关性(p=0.089)。3、RhoC和RhoGDIα的表达与肺鳞癌、腺癌患者临床病理参数间的关系将100例肺鳞癌、腺癌组织中RhoC和RhoGDIα的表达情况进行x~2检验，结果显示：RhoC的表达与淋巴结转移(p=0.000)、临床分期(p=0.004)有关；与性别(p=0.701)、年龄(p=0.204)、组织学分型(p=0.136)、分化程度(p=0.928)无关。RhoGDIα的表达同样与淋巴结转移(p=0.014)、临床分期(p=0.022)有关；而与性别(p=0.180)、年龄(p=0.755)、组织学分型(p=0.105)、分化程度(p=0.795)无关。4、RhoC和RhoGDIα的表达与肺鳞癌、腺癌患者预后间的关系Kaplan-Meier生存分析显示：RhoC和RhoGDIα蛋白阳性表达组患者的生存率明显低于阴性表达组(p=0.011，p=0.002)。对患者的年龄、性别、组织分型、分化程度、临床分期、淋巴结转移与RhoC、RhoGDIα的表达情况进行COX多因素分析发现：RhoC和RhoGDIα的表达可分别作为影响肺癌预后的独立风险因素(p=0.019，p=0.037)。结论1、RhoC、RhoGDIα在肺鳞癌、腺癌中的蛋白表达明显高于正常肺组织，RhoC和RhoGDIα的表达无明显相关性。2、RhoC、RhoGDIα与肿瘤的淋巴结转移和临床分期有关，二者的过表达与患者生存率低相关，在一定程度上提示患者预后不良。