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甲醛对生物体有很强的毒害作用。通过生物法降解甲醛将成为去除甲醛的有效手段。本文研究甲醛降解菌XJLW的降解条件,并尝试通过添加葡萄糖、叶酸和基因敲除等方法强化降解过程。本实验室已分离得到一株甲醛降解新菌株Methylobacterium sp. XJLW。经驯化后,该菌株对甲醛的耐受由0.1g/L提高至1.2g/L。通过单因素实验得到该菌株最佳甲醛降解条件为：酵母膏1g/L, KH2PO40.7g/L, K2HPO40.8g/L, MgSO40.5g/L,微量元素母液200μL/L,温度30℃,pH7.0,接菌量40mL/L。考察了接种量对不同初始浓度的甲醛的降解效果。接种量为1%(初始菌浓为0.02g/L),培养52h后,对初始浓度分别为0.6,0.9,1.2g/L的甲醛的降解率分别达94%,39%,31%。利用CaCO3法调控pH,该菌休止细胞(初始菌浓为0.5g/L)能降解初始浓度分别为2,15,30,45,60g/L的甲醛,培养8h,降解率分别为100%,96.8%,84.0%,26.5%,22.5%。考察该菌株对甲醇、甲醛和甲酸这三种物质的转化过程。CaCO3法调控pH0.5g/L细胞降解15g/L初始浓度甲醛,在0-24h内甲醛降解迅速,由最初的15.7g/L降为0.4g/L,甲酸浓度由0g/L增加至11.9g/L；甲醇经历了一个先增加后减少的过程,在4h时浓度达到的最大值10.1g/L,24h时减为5.2g/L；甲酸不断积累,24h时浓度为11.9g/L。24h之后甲醛降解速度缓慢,甲醇被缓慢降解,甲酸逐渐积累。通过在基本培养基中添加葡萄糖和叶酸,XJLW菌生长速度明显加快。在无机盐培养基中添加甲醇,考察不同初始浓度甲醇为唯一碳源时XJLW菌的生长情况。甲醇浓度增加不利于XJLW菌的快速生长。最佳甲醇浓度为1%。以在无机盐培养基中以1%甲醇为唯一碳源,分别添加葡萄糖和叶酸,6天后菌体重悬液的dD600nm值分别为4.8、4.3,对照为3.4,所以添加适量的葡萄糖或者叶酸有利于菌的生长。根据NCBI中公布的Methylo bacterium radiotolerans JCM2831菌株基因序列,设计了一对特异性引物,克隆了甲醛激活酶(Fae)基因片段,大小为512bp,与已报道的Methylobacterium radiotolerans JCM2831及Methylobacterium populi BJ001具有较高的同源性。将Fae片段连接至质粒pUC-18中,通过PCR扩增,酶切鉴定,Fae基因成功克隆至载体pUC-18中,成功构建中间载体pUC-18-Fae。