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卵黄免疫球蛋白(Yolk Immunoglobulin,IgY)是来源于禽蛋蛋黄的生物活性蛋白质,具有稳定性好、免疫应答性强、生产成本低等优点。IgY在食品、诊断试剂和日化卫消用品等多个领域均有广泛应用,是极具潜力的抗生素替代品。为了更好地满足IgY应用于不同场景的实际需求,需要综合考虑IgY的纯度、得率与生产成本,针对生产性价比以及不同应用领域要求生产出不同纯度级别的IgY产品。目前多数分离纯化IgY的研究处于实验室阶段,为了解决目前工业化生产IgY中存在的操作繁琐、能耗高、耗时长以及IgY纯度低等问题,本研究将连续流离心技术、动态错流过滤技术和盐析纯化相结合,建立了一套可大规模分级纯化IgY的制备技术。依据工艺流程可得到四种不同纯度级别的IgY产品,并进行了工业化生产线设计,为IgY的工业化生产提供一定的理论基础。主要研究结论如下:(1)水稀释法提取IgY的中试工艺条件研究。本章将水稀释法与连续流离心技术结合,研究了温度、水稀释倍数、p H和连续流离心条件对蛋黄浆质分离及脂蛋白去除的影响。最适水稀释条件是水稀释倍数1:9,p H 5.0,处理温度0℃,上清液中可溶性蛋白浓度为193.23 mg/m L蛋黄液,除脂率达到99%以上,对蛋黄颗粒的去除效果最好,适于IgY的初步分离。最适连续流条件是离心力12000×g,离心1次,上清液中可溶性蛋白浓度为188.60 mg/m L蛋黄液,蛋白损失率为2.40%,除脂率为97.50%,杂蛋白去除率高。最终IgY-Ⅰ产品的纯度为30.69%,得率为25.06mg/m L蛋黄液。本章所建立的方法可为IgY提取过程中大量处理稀释蛋黄液提供一定的理论基础,对于后续IgY的大规模生产具有重要意义。(2)动态错流膜分离技术对IgY稀释液的浓缩与纯化。本章采用动态错流过滤技术对IgY稀释液进行浓缩,研究了不同膜孔径,膜转速和跨膜压力对膜分离效率及IgY分离的影响。最适膜分离条件为膜孔径30 nm,膜转速1200 r/min,跨膜压力0.2 MPa。此条件下的平均通量最大(46.36 L/m~2/h),浓缩率为85.37%,IgY-Ⅱ产品的纯度为35.84%,得率为21.76 mg/m L蛋黄液,高于目前市售IgY产品。本技术可大规模浓缩IgY稀释液,具有条件温和、操作便捷、工作效率高等优点,可有效解决水稀释法体积过大、操作负荷大等问题,便于后续纯化步骤的进行。(3)盐析纯化制备高纯度IgY的研究。本章采用(NH4)2SO4和Na Cl结合的盐析方法纯化IgY,研究了不同盐浓度对IgY纯度、得率的影响及不同干燥方式对IgY产品品质的影响。所得IgY-Ⅲ和IgY-Ⅳ产品的纯度分别为67.17%和96.90%。最适干燥方式为真空低温喷雾干燥,所得IgY产品流动性较好,水分含量为2.44%,溶解度达到93.30%,堆积密度为0.48 g/cm~3,高于其他IgY产品。本方法可便捷有效地提高IgY的纯度,同时减少试剂的用量,是一种极具成本效益的工业化纯化方法。(4)年处理3500吨原料蛋的IgY生产线设计。采用全自动化设备,整条生产线符合HACCP标准,保证了产品的安全性、稳定性与一致性。本设计通过从产品方案、工艺流程、生产工艺衡算、设备选型及生产车间设计、辅助设施及综合管理等方面进行了全面设计。经过经济评价,该项目的固定投资金额为982.6万元,年总生产成本为1510.75万元,年净利润为5246.22万元,销售利润率为42.39%,投资回收期为2.67年。该项目理论上可带动当地60余人就业,促进蛋制品深加工产业的发展,具有良好的社会效益及经济效益。